ГЛАВА 2
ОБЪЕКТ НАБЛЮДЕНИЙ. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
ОБСЛЕДОВАННЫХ БОЛЬНЫХ
2.1. Объем и методы исследования
Исследования проведены в 2001-2004 г.г. в пульмонологическом отделении
городской детской клинической больницы № 16 г. Харькова (главный врач –
Т.В.Харченко) – базе кафедры факультетской педиатрии Харьковского
государственного медицинского университета и пульмонологических отделениях
Харьковской областной детской клинической больницы (главный врач – Н.И.Зыбина)
и Харьковской областной детской клинической больницы №1 (главный врач –
Н.Б.Зайцева), а также в лаборатории биохимических исследований (зав. отделом
экспериментальных методов исследований Ф.А.Колодуб) Института терапии АМН
Украины, г. Харьков (директор – проф. О.Я.Бабак).
Под наблюдением находились 100 детей в возрасте от 4 до 15 лет, из них 80
больных бронхиальной астмой и 20 здоровых детей аналогичного возраста, которые
составили группу контроля.
Основной метод работы – клинико-лабораторные исследование с анализом
клинико-лабораторных и инструментальных данных. Программа исследований включала
в себя тщательное комплексное клиническое, функциональное обследование
пациентов с оценкой физического развития, анализа данных анте-, интра- и
постнатального периодов; лабораторные (клинические анализы крови и мочи,
биохимические показатели крови, иммунологические показатели крови) и
инструментальные (спирография, пикфлоуметрия) методы исследований.
Диагноз заболевания верифицировали и формулировали согласно критериям,
предложенным Международным Консенсусом по бронхиальной астме и принятым II
Съездом фтизиатров и пульмонологов Украины (Киев, 1998).
Клинические исследования крови, мочи и мазков-отпечатков слизистой оболочки
носа проводили по общепринятым методам (В.Е.Предтеченский, [76]);
фракционирование белков – методом горизонтального электрофореза, содержание
общего белка в сыворотке крови – унифицированным биуретовым методом (В.Г.Колб,
В.С.Камышников [51]); гликопротеиды и серомукоид в сыворотке крови –
унифицированным орциновым методом после гидролиза серной кислотой [61].
Содержание электролитов (калия и натрия) в плазме измеряли по В.М. Бриккер [17]
методом пламенной фотометрии, кальция в сыворотке крови –
комплексонометрическим титрованием, неорганического фосфора –
молибденово-кислым способом [74]. Уровень холестерина определяли по методу
Илька [165], в-липопротеидов турбодиметрическим методом Бурштейна [51].
Иммунологические методы включали: определение уровней основных классов
иммуноглобулинов (А, М, G) в сыворотке крови методом радиальной иммунодиффузии
в агаре Difko по G.Mancini et al. [191]; уровень общего IgE в сыворотке крови
определяли с помощью иммуноферментного анализатора с использованием тест
системы фирмы «Labodia» (Швейцария); циркулирующих иммунных комплексов – по
V.Haskova et al. [156] в модификации Ю.А.Гриневича и А.Н.Алферова (1978);
клеточное звено иммунитета изучали путем определения в крови В-лимфоцитов
(CD19) и субпопуляций Т-лимфоцитов (CD3, CD4, CD8) с помощью моноклональных
антител, меченных Fiec, методом иммунофлюоресценции на иммунофлюоресцентном
микроскопе, используя коммерческие наборы «Протеиновый контур»
(Санкт-Петербург), а так же Т0 и Такт-лимфоцитов по методу H.Fudenberg et al.
(1975); фагоцитарную активность нейтрофилов – с помощью теста спонтанного
поглощения и восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) до нерастворимого
диформазона по методу J.Stuart et al. в модификации Б.С.Нагоева [72].
Состояние интралейкоцитарных микробиоцидных систем полиморфноядерных
нейтрофилов периферической крови оценивали по содержанию гранулоцитарных
факторов – миелопероксидазы (МП) и лизосомально-катионных белков (ЛКБ).
Определяли средний цитохимический коэффициент содержания МП в нейтрофилах по
методу Грэхема-Кноля и средний цитохимический коэффициент содержания ЛКБ по
методу М.Г.Шубича [61]. Изучение уровня лейкотриенов B4, C4, D4, E4 в плазме
крови проводилось иммуноферментным методом по стандартному протоколу тест
системы «Cayman» (США), а уровня оксида азота в плазме крови –
спектрофотометрическим методом Грисса-Илосвая [23] с сульфаниловой кислотой и
1-нафтоламином.
Состояние функции дыхательной системы определялось с помощью методов
спирометрии и пикфлоуметрии. Данные методы, согласно классификации клинических
форм бронхиальной астмы у детей, рекомендуются для оценки тяжести течения
заболевания.
Спирометрия проводилась с помощью пневмотахографа фирмы Custo-Vit (Germany)
утром натощак, при этом исключив накануне прием бронхоспазмолитиков. После
предварительной тренировки пациенты трижды выполняли форсированный вдох и
выдох. Полученные результаты рассчитывались с учетом антропометрических
показателей пациента, а также температуры и влажности воздуха в помещении в
абсолютных числах и процентах от индивидуальных должных показателей,
рассчитанных по формулам Европейского товарищества стали и угля [86].
При проведении спирометрии определяли и анализировали следующие показатели:
ФЖЕЛ – форсированная жизненная емкость легких по выдоху;
ОФВ1 – объем форсированного выдоха за первую секунду (в % от должных величин),
который является наиболее информативным показателем для оценки бронхообструкции
и тяжести бронхиальной астмы;
ПОСвыд – (ПОС) – пиковая объемная скорость выдоха;
МОС25, МОС50 и МОС75 – максимальная объемная скорость после выдоха обозначенной
части ФЖЕЛ – 25%, 50% и 75% соответственно.
С целью выявления обратимости бронхиальной обс
- Київ+380960830922