СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ак — аминокислота
ВОЗ — Всемирная Организация Здравоохранения
вэжх — высокоэффективная жидкостная хроматография
гжх — газо-жидкостная хромато1рафия
гост — государс твенный стандарт
ИКСФ — инфракрасная спектрофотометрия
лс — лекарственное средство
М1 — матриксный белок
М2 — трансмембранный белок
и.о. — нуклеотидное основание
ОРВИ — острая респираторная вирусная инфекция
МЦР — полимеразная цепная реакция
РГА — реакция гемагглютинации
РЫП (КЫР) — рибонуклеопротеид
РТГА — реакция торможения гемагглютинации
тех — тонкослойная хроматография
УФСФ — ультрафиолетовая спектрофотометрия
ФСП — фармакопейная статья предприятия
НА — гемагглютинин
ЫА — нейраминидаза
ЫР — нуклеонротсин
АМИНОКИСЛОТЫ
Краткое обозначение Название Краткое обозначение Название
А аланин Ь лейцин
К аргинин К лизин
N аспарагин м метионин
и аспарагиновая кислота Е фенилаланин
— 1 — С цистеин Р пролин
Е глутаминовая кислота 8 серии
О глутамин Т треонин
С глицин \У триптофан
Н гистидин У тирозин
I изолейцин V валин — . —1
2
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ i 5 1
I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫ i 11
Часть 1. ХАРАКТЕРИСТИКА ВИРУСОВ ГРИППА : и i
1.1. История этиологии и эпидемиологии гриппа i11
1.2. Классификация i 16
1.3. Организация генома и функции вирусных белков 16
1.3.1. Белки полимеразного комплекса (РВ2, PBI и РА) ! 18
1.3.2. Гемагглютинин 18
1.3.3. Нуклсопротеин ! 20
1.3.4. Нейраминидаза 1 20
1.3.5. Матриксный (М1) и трансмембранный белок (М2) 21
1.3.6. Неструктурные белки (NS1 и NS2) 24
1.4. Клинические признаки и патогенез 24
1.5. Мировая система мониторинга гриппа 29
Часть 2. ПРОТИВОВИРУСНЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА 31
1.6. Амантидин и римантадин как блокаторы белка М2 31
1.7. Занамивир и озельтамивир как ингибиторы нейраминидазы 34
1.8. Арбидол 37
1.9. Контроль качества противовирусных лекарственных средств и 40
стандартизация метода ПЦР
1.10. Резистентность к лекарственным средствам - основная проблема современной химиотерапии гриппа 47
11 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 59
2.1. Материалы 59
2.1.1. Штаммы вирусов гриппа А 59
2.1.2. Химические реагенты 61
2.1.3. Реагенты и наборы для молекулярной биологии 61
2.1.4. Оборудование | 62
2.1.5. Расходные материалы и лабораторная посуда 63
2.2. Методы 64
3
Службы здравоохранения не были подготовлены к борьбе с пандемией. Антибиотики, которые могли спасти многих от смерти в результате последующей бактериальной инфекции, еще не были изобретены. Об эффективной вакцине не могло быть и речи: вирус гриппа был впервые выделен из организма человека только в 1933г. В период пандемии но подсчетам специалистов заболело 25-30% населения'земного шара. В-мировом масштабе потери оказались огромными: во многих регионах ожидаемая продолжительность жизни снизилась на 10 лет и более-[WHO,avian influenza 2006, rus].
Серьезные последствия испанского гриппа, затронули и население России вовремя второй пандемической волны. Отношение заболевших к числу населения выражаюсь в следующих цифрах: от 50 и выше случаев на 1000 человек во Владимирской области; от 35 до 50 - в Псковской и Смоленской, и от 25 до 35 в Новгородской, Калужской, Орловской и Казанской областях [Перуанский А. 1919г].
В конце 20-го века, определение нуклеотидной последовательности генома вирусов, изолированных из замороженного трупного материала, не позволило дать однозначный ответ на вопрос о природе пандемического вируса 1918 года. На основании результатов определения нуклеотидной последовательности и филогенетического анализа генов пандемического вируса, было высказано предположение, что штамм 1918 г. является рсассортантом, сформированным человеческим вирусом гриппа и предком современных вирусов гриппа птиц [Taubenbcrger J.K. 2005]. Сторонники другой теории утверждают, что данный вирус не является реассортантным. По их мнению, вирус «испанки» имеет характеристики птичьего вируса, который незадолго до пандемии адаптировался к человеку в результате изменений не связанных с процессом реассортации [Gibbs M.J. 2006]. Исследования генетических характеристик пандемического вируса «испанки» и причин столь высокой вирулентности, проводятся до сих пор.
В 1957-1958 гг. произошла пандемия, вызванная вирусом H2N2, которая получила название "Азиатский грипп". Пандемия началась в феврале 1957 г. на дальнем востоке и быстро распространилась по всему миру, однако все были лучше подготовлены к ней, чем в 1918 г. Вакцинация приводила к снижению сезонной заболеваемости на 75% и более. Уже были открыты антибиотики,
которые помогали в лечении осложнений, в частности бактериальной пневмонии. Десять лет работала Глобальная сеть наблюдения за гриппом ВОЗ — инструмент вирусологического мониторинга и раннего оповещения [WHO,avian influenza 2006, rus]. Общие человеческие потери во время пандемии Азиатского гриппа достигли одного миллиона человек [Potter С.W. 2001J.
Пандемия, начавшаяся в 1968г., была еще слабее пандемии 1957г. Первая вспышка острого респираторного заболевания была отмечена в июле на юго-востоке Китая. Установлено, что возбудителем инфекции является новый подтип вируса гриппа A(1I3N2) и вскоре ВОЗ выпустила предупреждение о возможности новой, пандемии, по модели распространения сходной с пандемией 1957г. Наибольшее число заболевших было моложе 65 лет, поскольку более пожилые люди, пережившие пандемию 1957г. (вирус A(H2N2)), имели частичный-иммунитет к новому штамму. Несмотря на то, что точных данных о смертности не имеется, мировой прирост числа смертельных случаев можно оценить примерно в 1 миллион [Dowdle W.R. 1999J.
В 1977-1978 гг. произошла глобальная эпидемия, названная «русским гриппом» [Колобухина Л.В., Львов Д.К. 2008]. Вирус гриппа A(H1N1), вызвавший эту эпидемия являлся причиной эпидемии в 50-х г. Поэтому в первую очередь пострадали лица, родившиеся после 1950 г. [Kilboumc E.D. 2006]. По поражаемому контингенту и серотипу вируса, вовлеченного в эпидемическое распространение, эпидемия «Русского гриппа» напоминал пандемию «испанки» 1918—1920 гг., однако последствия были уже иными. Так, в 57,8% случаев течение болезни было легким и в 42,2% — средней тяжести. Первая вспышка заболевания, произошла в мае 1977 г. в Китае. В течение 5 мес. вирусы 1риппа распространились в другие части Азии, достигли России, а затем охватили Европу, Америку и Южное полушарие [Карпухин Г.И. 2000]. Подводя итоги глобальной эпидемии 1977 года, ученые пришли к заключению, что ее наиболее важной особенностью явился сдвиг возрастного распределения больных в сторону преобладания молодых людей, что объясняется только влиянием иммунологических факторов [Карпухин Г.И. 1979].
15
- Киев+380960830922