ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Объекты исследования
В ходе работы были исследованы образцы ткани тела матки без новообразований и
образцы резецированной ткани эндометрия и миометрия с новообразованиями у
женщин, не получавших медикаментозного дооперационного лечения. В контрольную
группу вошли 102 пациентки, у которых при гистологическом исследовании не было
обнаружено патологии эндометрия и миометрия. Материал для исследования был
предоставлен Одесским областным онкодиспансером.
Для исследований были выбраны следующие возрастные группы женщин без опухоли и
женщин с новообразованиями:
1 группа – 31-40 лет;
2 группа – 41-50 лет;
3 группа – 51 –60 лет;
4 группа – 61-70 лет.
Выбор именно таких возрастных групп был обусловлен статистикой онкозаболеваний
женщин СНГ по их возрастных особенностях. В частности, максимальная
заболеваемость раком тела матки отмечается в возрасте 50-59 лет [35, 63]. По
мнению М.И. Глебовой (1986) [35], большое значение имеет то обстоятельство, что
у большинства женщин, страдающих раком тела матки, менопауза наступает после 50
лет.
По мнению Я.В. Бохмана (1985) [6], каждому возрастному диапазону, который
разбивается по десятилетиям жизни женщин, присуща большая вероятность
заболевания той или иной формой опухоли тела матки:
II десятилетие (10-19 лет). Единичные случаи заболеваний.
III десятилетие (20-29 лет). Заболеваемость раком матки и яичников несколько
увеличивается: в 25-30 лет отмечаются возрастные пики пузырного заноса и
хориокарциномы. Это время наиболее высокой фертильности, чем и обусловлено
характерное возрастное распределение случаев трофобластической болезни.
Одновременно отмечается высокая частота фоновых процессов шейки матки, обычно
развивающихся после родов. Пик сочетания всех злокачественных опухолей с
беременностью приходится, в среднем, на возраст 26-29 лет. Атипическая
гиперплазия и рак эндометрия редки, но надо учитывать их сочетание с синдромом
склерокистозных яичников.
IV десятилетие (30-39 лет) - наиболее высокая частота возникновения дисплазии и
преинвазивного рака шейки матки, миомы матки.
V десятилетие (40-49 лет) – наблюдается постепенное нарастание заболеваемости
всеми видами злокачественных опухолей женских половых органов. 45-49 лет –
весьма опасный с онкологических позиций переходный период пременопаузы, для
которого характерны высокая частота и выраженность нарушений репродуктивного и
энергетического гомеостаза (ановуляция, относительная или абсолютная
гиперэстрогения, нарушение жирового и углеродного обмена). Комплекс этих
патогенетических особенностей обусловливает возрастные пики железистой и
атипической гиперплазии эндометрия. На пременопаузу приходятся возрастные
подъемы заболеваемости доброкачественными опухолями яичников и эндометриальными
стромальными саркомами матки. Нарастанием эндокринно-обменных нарушений и
предраковых заболеваний эндометрия можно объяснить тот факт, что пременопауза
как бы готовит к “взрыву” заболеваемости раком тела матки в 6 десятилетии.
VI десятилетие (50-59 лет) – постменопауза. Отмечаются возрастные пики
заболеваемости злокачественными опухолями женских половых органов – раком шейки
матки, раком тела матки и яичников.
VII десятилетие (60-69 лет) – возрастная инволюция репродуктивных органов,
иммуносупрессия (преобладание) клеток супрессоров над киллерами. Показатели
заболеваемости всеми видами злокачественных опухолей остаются высокими.
Одной из наиболее часто поражаемых онкозаболеваниями тканью матки является
эндометрий. Поэтому именно эта ткань была избрана в качестве материала при
исследовании развития злокачественной опухоли.
Для того чтобы проследить изменения функционирования ферментов, входящих в
систему протеолиза, были избраны заболевания с нарастающим уровнем дисплазии
клеток эндометрия: железисто-кистозная гиперплазия, аденоматоз и аденокарцинома
с высокой, умеренной и низкой степенями дифференциации клеток; для миометрия
нами была выбрана наиболее встречающаяся доброкачественная патология –
фибролейомиома с разным пролиферативным потенциалом опухолевых клеток.
Выбор данной группы заболеваний связан, во-первых, с их широким
распространением и, во-вторых, с хорошо разработанными критериями определения
стадии заболевания.
Таким образом, данный подбор новообразований позволил исследовать ряд,
начинающихся с воспалительного процесса и перерождающихся в злокачественные
новообразования на условно первой, второй и третьей стадиях.
Подготовка проб
Удаленную, в результате оперативного вмешательства, ткань отмывали от крови
охлажденным до + 4 °С 0,9 % раствором NaCl, гомогенизировали при + 4 °С с 0,9 %
раствором NaCl (в соотношении 1:10) и центрифугировали при 12000 g (при + 4 °С
) в течение 45 мин.
Полученную надосадочную жидкость после гомогенизирования ткани использовали для
проведения биохимических исследований.
2.2. Обоснование используемых методик
Поскольку протеолитический потенциал клеток в значительной степени определяется
лизосомальным аппаратом, исследование этих ферментов при онкопатологии в теле
матки представляет немалый интерес.
По литературным данным известно, что для протеолитических ферментов характерен
"каскадный" механизм активации зимогенов [25, 81]. В результате исследований мы
попытались выяснить долю участия основных протеолитических ферментов на модели
канцерогенеза тела матки. Предполагают, что одними из первых включающихся в
процесс инвазии и метастазирования, вовлекаются катепсин D-подобные протеиназы,
обладающие широкой субстратной специфичностью, расщепляющие протеогликаны
внеклеточного матрикса, принимающие участие в процессинге лейкокининов
(последние спо
- Київ+380960830922