2
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АБТС - 2,2азиноди(3-этилбензотиазолин-сульфокислота)диаммониевая соль АГ(АТ) • антиген (антитело)
АЭЭИ - аминоэтилэтиленимин
ВГНКИ - Всероссийский Государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов ВНБ - вирус ньюкаслской болезни
ВНИИЗЖ - Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных
ИББ - инфекционная бурсальная болезнь
ИБК - инфекционный бронхит кур
ИЛТ - инфекционный ларинготрахеит
ИФА - иммуноферментный анализ
ЯП - лейкоз птиц
НБ - ньюкаслская болезнь
НТД - нормативно-техническая документация
ОФД - ортофенилендиамин
ПМВ - парамиксовирус
РГА - реакция гемагглютинации
РДП - реакция диффузной преципитации
РЕО - реовирусная инфекция
PH - реакция нейтрализации
РСК - реакция связывания комплемента
РТГА - реакция торможения гемагглютинации
ССЯ-76 - синдром снижения яйценоскости
ФБР - фосфатно-буферный раствор
ЭЭЖ - экстраэмбриональная жидкость
ЭЛД50 (ЭИДя) - 50% эмбриональная летальная (инфекционная) доза 1СР1 - интрацеребральный индекс патогенности 1УР1 - интравенозный индекс патогенности
МРТ - среднее время гибели эмбрионов от минимальной летальной дозы
3
ОГЛАВЛЕНИЕ
стр.
1. ВВЕДЕНИЕ........................................................5
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1 .Общая характеристика ньюкаслской болезни.....................10
2.1.1. Клинические признаки и формы проявления....................13
2.1.2. Патологоанатомические изменения............................16
2.2. Классификация и строение птичьих парамиксовирусов............16
2.3. Морфология и химический состав вируса ньюкаслской болезни. Устойчивость к физическим воздействиям..................18
2.4. Гемагглютинирующая активность вируса НБ......................20
2.5. Антигенная активность вируса НБ..............................21
2.6. Иммунитет и специфическая профилактика.......................22
2.7. Диагностика ньюкаслской болезни кур..........................25
2.7.1. Выделение вируса...........................................25
2.7.2. Серологическая диагностика.................................29
2.7.3. Реакция торможения гемагглютинации.........................29
2.7.4. Реакция нейтрализации......................................32
2.7.5. Реакция связывания комплемента.............................33
2.7.6. Реакция диффузной преципитации.............................33
2.8. Иммуноферментный анализ......................................33
2.9. Применение ИФА в диагностике ньюкаслской болезни.............38
3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Материалы и методы...........................................42
3.2. Результаты собственных исследований..........................50
3.2.1. Разработка набора для определения уровня антител
к вирусу ньюкаслской болезни в РТГА..........................50
3.2 2. Разработка метода выявления и определения активности
антигена вируса НБ в непрямом сэндвич-варианте ИФА...........56
3.2.3. Очистка и концентрирование вируса НБ.......................63
12
форма заболевания у кур была впервые отмечена на Среднем Востоке в конце 70-х годов(117).
Источником инфекции является больная птица. Резервуаром возбудителя служит домашняя птица других видов, а также дикие, синантропные и экзотические птицы (36). Заражение происходит при контакте больной птицы со здоровой, а также опосредованно через воздух, воду, корм, перо, пух, одежду спецперсонала и т.п. (26,31)
При описании способов горизонтальной передачи ВНБ между птицами Alexander (36) заключил, что заболевание возникает в одном из двух случаев: при вдыхании или проглатывании вируса. То есть главным образом, ВНБ передается мелкими аэрозолями или крупными каплями. Очевидно, что птицы, находящиеся в такой атмосфере, заболевают. Также аэрозоли, содержащие вирус, могут выделяться в дальнейшем инфицированными птицами. Эти вируссодержащие капли могут вдыхаться или проглатываться контактной птицы, вызывая заболевание. Способность аэрозолей образовывать и поддерживать вирус в инфекционной форме в течение периода времени, достаточного для передачи, зависит от многих факторов окружающей среды.
При заболевании НБ у большинства птиц значительное количество вируса выделяется с фекалиями. Поедание фекалий является основным способом распространения авирулентных кишечных изолятов вируса ньюкаслской болезни, обычно не вызывающих респираторных клинических признаков у инфицированной птицы (43).
Вертикальная передача, то есть переход вируса от родителей к потомству через эмбрионы, является спорным вопросом (7,36). Действительное значение такой передачи в условиях эпизоотии ньюкаслской болезни не выяснена. Экспериментальная оценка с использованием высоковирулентных вирусов, обычно затруднялась тем, что заражённые куры прекращали нести яйца. Треснутые или разбитые инфицированные яйца могут служить источником вируса для только что вылупившихся цыплят, также как и вируссодержащие фекалии, способные контаминировать яйца снаружи. Вирус может также проникать через
скорлупу после кладки (191), тем самым, осложняя оценку возможности вертикальной передачи. Инфицированные цыплята могут вылупиться из яиц, содержащих вакцину или другой лентогенный штамм вируса, который не всегда приводит к гибели эмбриона (74, 83). В естественных условиях непонятно, как эмбрионы становятся инфицированными, хотя вакцина из штамма Ла-Сота присутствует в большинстве репродуктивных органов после иммунизации (157). Было доказано наличие лентогенных штаммов вируса в куриных эмбрионах и в молодом потомстве, включая однодневных цыплят, полученных от вакцинированного поголовья (154). Capua и др. (71) смогли выделить высоковирулентный штамм ВНБ из клоакальных мазков птиц, которые снесли яйца, несмотря на высокие титры антител к вирусу у вылупившихся цыплят.
2.1.1. Клинические признаки ньюкаслской болезни. Ньюкаслская болезнь осложняется тем, что разнообразные изоляты и штаммы вируса могут индуцировать большое количество форм заболевания. Beard и Hanson провели разделение на 5 форм болезни на основе клинических признаков у кур (55):
1) Doyle's форма (77)- острая, смертельная инфекция для кур всех возрастов. Обычно наблюдаются геморрагические поражения в пищеварительном тракте, и эта форма болезни имеет название висцеротропная велогенная ньюкаслская болезнь (ВВНБ).
2) Beach s форма (52)- острая, часто летальная инфекция для кур всех возрастов. Видны характерные респираторные и нейрогенные признаки, отсюда название: нейротропно-велогенная ньюкаслская болезнь (НВНБ).
3) Beaudette S форма (57). Эта, по-видимому, менее патогенная форма, в которой смертность обычно наблюдается только у цыплят. Вирусы, вызывающие этот тип инфекции, относятся к мезогенным штаммам и могут быть использованы как вторичные живые вакцины.
4) HitchnerS форма (105). Эта форма представлена слабыми или скрытыми респираторными инфекциями, вызываемые вирусами лентогенных штаммов, которые обычно используются как живые вакцины.
- Київ+380960830922