Разработка ассоциированной вакцины против сибирской язвы и оспы овец

2
СОДЕРЖАНИЕ.
I. Введение 5
2. Обзор литературы 10
2.1. Сибирская язвы - распространение и вакцинолрофилактика 10
2.1.1. Морфолог ия возбудителя 10
2.1.2. Распространение болезни 10
2.1.3. Разработка и применение вакцин 12
2.2. Оспа овец - распространение и вакцинопрофилактика 20
2.2.1. Морфология возбудителя 20
2.2.2. Распространение болезни 20
2.2.3. Разработка и применение вакцин 22
2.3. Проблема разработки ассоциированных вакцин в ветери-
нарной практике 28
2.3.1. История и современное состояние использования ассоции-
рованных вакцин в ветеринарии 28
2.3.2. Разработка ассоциированных вакцин против инфекционных
* болезней овец ’ 36
2.3.3. Исследования по созданию ассоциированных вакцин прот ив
сибирской язвы и оспы овец 39
2.4. Требования, предъявляемые к производственным штаммам
микроорганизмов 43
2.5. Заключение 45
3. Собст венные исследования. 46
3.1 Маге])налы и методы 46
3.1.1. Материалы 46
3.1.1.1. Бактерии и вирусы 46
3.1.1.2. Питательные среды, растворы и культуры клеток 46
3.1.1.3. Животные 46
3.1.1.4. Оборудование 47
3.1.2 Методы 47
3.1.2.1. Определение культурально-морфологических свойств
штамма 55-ВНИИВВиМ возбудителя сибирской язвы 48
3.1.2.2. Определение массовой доли влаги 49
3.1.2.3. Определение безвредности 49
3.1.2.4. Определение иммуногенной активности 50
3.1.2.5. Серол о г и ч еск ие и с сл е до ва н и я 50
3.1.2.5.1. Реакция непрямой гемагглют инации 50
3.1.2.5.2. Реакция нейтрализации 50
3.1.2.6. Кожно-аллергическая проба 50
3.1.2.7. Гемагологические исследования 51
3.1.2.8. Определение чувствительности штамма 55ВНИИВВиМ к
антибиотикам 51
3.1.2.9. Про и з во детве н н ы е и с и ыта н и я 51
3
51
52
52
52
55
58
59
59
61
62
64
64
68
70
71
74
74
77
79
87
88
89
104
Статистическая обработка результатов Результаты собственных исследований Разработка лабораторного образца ассоциированной вакцины против сибирской язвы и оспы овец Изучение совместимости вакцинных штаммов сибирской язвы и оспы овец и возможность использования смеси коммерческих монопрепаратов в качестве ассоциированной вакцины
Определение чувствительности штамма 55-ВНИИВВиМ Вас. аШИгааБ к антибиотикам
Проверка оптимального соотношения сибиреязвенного и оспенного компонентов в ассоциированном препарате Разработка экспериментальной ассоциированной вакцины против сибирской язвы и оспы овец
Изготовление экспериментальной ассоциированной вакцины против сибирской язвы и оспы овец Изучение культурально-морфологических свойств вакцинных штаммов в ассоциированном препарате Изучение биологической активности экспериментальной ассоциированной вакцины
Изучение безвредности ассоциированной вакцины против сибирской язвы и оспы овец
Изучение иммуногенности ассоциированной вакцины против сибирской язвы и оспы овец
Изучение иммунного ответа у овен на введение ассоциированной вакцины серо-аллергическими методами Изучение продолжительности иммунитета у овец, привитых ассоциированной вакциной
Влияние сроков и условий храпения ассоциированной вакцины на ее биологические свойства.
Изучение иммуногенности ассоциированной вакцины через 12 месяцев хранения
Исследования крови овец привитых ассоциированной вакциной
Испытания ассоциированной вакцины против сибирской язвы и оспы овец в производственных условиях Обсуждение резул ьтатов Выводы
Практические предложения Список использованной литературы Приложения
10
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
2.1. Сибирская язва - распространение и вакцинопрофилактика.
Сибирская язва (Anthrax) - особо опасная инфекционная болезнь всех видов животных и человека, характеризующаяся острым течением, признаками септицемии, тяжелой интоксикацией, образованием карбункулов. Относится к почвенно-очаговым заболеваниям и носит стационарный характер. В прошлом она наносила огромный ущерб животноводству и не редко вызывала массовое заболевание людей (Колесов С.Г., 1976; Бакулов И.А., с соавт., 1996).
2.1.1. Морфология возбудителя.
Возбудитель сибирской язвы - Bacillus anthracis - неподвижная, грамположительная палочка шириной 1,0 - 1,2 мкм и длиной 3 - 5 мкм либо
1,0 - 1,3 х 3 - 10 мкм (Дунаев Г.В., 1972; Колесов С.Г., 1976). Возбудитель может существовать в трех формах: капсульной (в организме животного или на специальных питательных средах), вегетативной бескапсульной (на обычных питательных средах), споровой (во внешней среде и при особых условиях культивирования на питательных средах). На плотных питательных средах микроб образует характерные колонии R-формы, на средах с пенициллином бациллы образуют сферопласты (Chatterjll B.R, Williams R.P., 1965), так называемое “жемчужное ожерелье”
2.1.2. Распространение.
Сибирская язва была известна человечеству в древние времена. В Библии описаны случаи падежа среди лошадей, ослов, верблюдов, мулов, и коз, а также смерти людей от “злых черных пятен” (Sobemheim О., 1931). Ее диагностировали во многих странах мира, где географические, почвенные и температурные условия были благоприятны для сохранения и развития возбудителя во внешней среде. Распространению сибирской язвы способствовали развитие государств и народов, передвижение людей и животных на большие расстояния, усиление межгосударственных связей, войны.
11
В дореволюционной России постоянно регистрировались заболевания скота сибирской язвой. По данным Михина H.A. (1942), с 1900 по 1912 г. ежегодно заболеваю этой болезнью от 40 до 60 тыс. голов скота. В период первой мировой войны положение стаю еще более неблагополучным, в результате чего перед ветеринарной службой страны была поставлена неотложная задача - организация мер по профилактике сибирской язвы. В период второй мировой войны и послевоенные годы внимание к противоэпизо-отическим мерам не были ослаблены, а проводимая ежегодная плановая массовая вакцинация сельскохозяйственных животных обеспечила резкое снижение заболеваемости сибирской язвой (Колесов С.Г., 1974; Коротич
A.C., Погребняк Л. И., 1976; Ипатенко Н.Г.,1982; Черкасский В Ю, 1983).
Общая обстановка в мире но сибирской язве, с точки зрения географии этой болезни, мало в чем изменилась за последние 30 лет. По-прежнему она регистрируется на всех континентах и не наблюдается только па Крайнем Севере и на немногочисленных островных территориях.
Наиболее напряженная эпизоотическая ситуация на Африканском, Азиатском и Южноамериканском континентах, однако она регистрируется и в Европе. Наибольшее число очагов (вспышек) болезни отмечено в следующих странах: в Европе - Г реции, Италии, Испании, Албании, Румынии; в Америке - Гватемале, Гондурасе, Чили, Гаити, Перу, Канаде, СИЛА; в Африке - странах западной и центральной зоны; в Азии - Сирии, Индии, Шри-Ланке, Турции; есть сообщения о вспышках сибирской язвы в Австралии. (Бакулов И.А., Гаврилов В.А., 2000).
Как это не печально, но сибирской язвой продолжают болеть и люди. Так в Африке за 1970-1990 гг. в Буркина Фасо зарегистрировано 497 случаев только в 1977 г., в Египте - 2043 в 1979, Кении 327 в 1976, Мали - 152 в 1978 и 121 в 1980, Руанде - 300 в 1980 и 249 в 1981, Сенегале - 160 в 1981, Судане - 1362 в 1981; в Азии - Иране - 200 в 1978, 391 в 1980 и 182 в 1981, Ираке - 200-269 ежегодно в 1976-1980 гг., Таиланде - 116 в 1981 и 251 в