I
2
СОДЕРЖАНИЕ
ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ............................. 6
ВВЕДЕНИЕ................................................ 8
1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ....................................... 13
1.1. Распространенность чумы мелких жвачных.............. 13
1.2. Характеристика возбудителя чумы мелких жвачных.... 14
1.2.1. Таксономическое положение вируса.................. 14
1.2.2. Морфология вируса................................. 15
1.2.3. Белковый состав вириона........................... 16
1.2.4. Транскрипция и репликация вируса.................. 18
1.2.5. Культивирование вируса............................ 19
1.2.7. Устойчивость вируса............................... 21
1.3. Эпизоотические особенности болезни.................. 22
1.4 Эпизоотическая ситуация но ЧМЖ в мире................ 23
1.5. Патогенез........................................... 27
1.6. Локализации вируса................................. 28
1.7. Клинические признаки................................ 29
1.8 Патолого-анатомические изменения..................... 31
1.9. Гистологические изменения........................... 35
1.10. Диагностика болезни................................ 38
1.11. Иммунитет и специфическая профилактика............. 43
1.12. Меры борьбы.. .................................... 46
1.13. Заключение......................................... 46
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАН ИЯ.............................. 48
2.1. Материалы........................................... 48
2.1.1. Вирус............................................. 48
2.1.2. Животные.......................................... 48
2.1.3. Культуры клеток................................... 48
2.1.4. Реактивы и растворы............................... 48
2.2. Методы исследований................................. 50
3
2.2.1. Культивирование культур клеток....................... 50
2.2.2. Культивирование вируса............................... 52
2.2.3. Подбор чувствительных культур клеток для культивирования вируса ЧМЖ.................................. 54
2.2.4. Определение биологической активности вирусов......... 54
2.2.5. Определение уровня вируснейтрализующих антигел к
вирусу ЧМЖ.................................................. 56
2.2.6. Изготовление живой лиофилизированной вакцины......... 57
2.2.7. Определение стерильности, безвредности и антигенной активности вирусвакцины..................................... 57
2.2.8. Проведение качественного анализа риска заноса возбудителя ЧМЖ на территорию РФ............................ 58
2.2.9. Статистическая обработка результатов................. 59
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 60
3.1. Качественный анализ риска заноса ЧМЖ на территорию России...................................................... 60
3.1.1. Идентификация опасности.............................. 60
3.1.2. Анализ эпизоотической ситуации....................... 60
3.1.3. Плотность распространения восприимчивых к ЧМЖ животных.................................................... 61
3.1.4. Приграничная торговля и миграция населения........... 62
3.1.5. Возможные пути заноса ЧМЖ на территорию России 63
3.2. Идентификации вируса ЧМЖ штамма «ВНИИЗЖ» 64
3.3. Усовершенствование условий культивирования вакцинного вируса ЧМЖ штамма «ВНИИЗЖ»....................... 67
3.3.1. Изучение чувствительности различных клеточных систем
к вирусу ЧМЖ................................................ 67
3.3.2. Накопление вируса ЧМЖ в культуре клеток СИ-91 при разной множественности инфицирования........................ 70
3.3.3. Влияние системы культивирования на репродукцию
14
жвачным вирус ЧКРС, потерявший вирулентность для крупных жвачных [88, 90, 142, 143). В дальнейшем Jehson R.H., Bourdin Р., Hamdy F.M. и другие установили отличительные особенности вируса ЧМЖ от вируса чумы КРС [87, 133, 138].
В 1971 году ЧМЖ обнаружили в Чаде, Уганде, Танзании.
В 1980 году на Международном симпозиуме (Нигерия) было принято официальное название болезни «чума мелких жвачных», где вирус ЧМЖ был выделен в отдельную нозологическую группу рода Morbillivirus и в дальнейшем классифицирован Международным комитетом по таксономии вирусов.
Многие годы исследователи считали, что ЧМЖ локализована лишь в Центральной Африке, но в 1972 году заболевание было выявлено в Судане, где оно первоначально было диагностирована как чума крупного рогатого скота [164].
1.2. Характеристика возбудителя чумы мелких жвачных
1.2.1. Таксономическое положение вируса
Возбудителем ЧМЖ является РНК-содсржащий вирус отряда Mononegavirales, семейства Paramyxoviridae, подсемейства Paramyxovirinae, рода Morbillivirus [2, 32, 47, 54, 141, 218, 226].
Отряд Mononegavirales включает четыре семейства оболочечпых вирусов, геном которых представлен1 линейной, несегментированной, негативной односпиралыюй РНК.
Семейство Paramyxoviridae включает в себя три рода, относящиеся к подсемейству Paramyxovirinae: Respirovirus, Rubilavirus, Morbillivirus [32, 226].
Род Morbillivirus представлен 6 видами: Canine distemper virus, Cetacean morbillivirus, Measles virus (Edmonston virus), Pest-dcs-petits-ruminants virus, Phocine distemper virus (Seal distemper virus), Rinderpest virus. Представители данного рода имеют большее родство между собой, чем с представителями
15
других родов того же подсемейства [32, 75, 97, 123, 126, 150, 155, 161, 165, 176, 177, 179, 200].
Вирус чумы мелких жвачных по своим биологическим характеристикам наиболее сходен с вирусом чумы КРС, и между ними отмечена в разной степени перекрестная защита и серологическая взаимосвязь [126].
При анализе аминокислотной последовательности ¥~ и И-белков рода парамиксовирусов и морбилливирусов видно, что морбилливирусы образуют близкородственную группу, причем вирус кори более аналогичен вирусу ЧКРС, а вирус чумы собак - более родственен вирусу чумы тюленьих. Однако снова выясняется, что вирус ЧМЖ представляет собой особый вирус и не так близкородственен вирусу ЧКРС, как следовало ожидать но результатам анализов с использованием серологических методов. Неполное антигенное родство вируса ЧМЖ было подтверждено и в опытах перекрестного заражения вирусами ЧКРС, чумы собак и кори [32, 101, 118, 121, 157, 191,213].
Штаммы вируса ЧМЖ, выделенные в разных регионах африканского континента, идентичны в антигенном отношении, но различаются между собой по вирулентности и иммуногенности. Часто названия штаммов являются условными и, в основном, отражают место и время выделения вируса от больных животных.
Штаммы вируса ЧМЖ, различаясь по нуклеотидной последовательности, формируют четыре филогенетические группы. Но все они идентичны по результатам PH [32, 121,222, 226].
1.2.2. Морфология вируса
При изучении морфологии вирусов ЧМЖ методом электронной микроскопии была установлена типичная для парамиксовирусов форма. Вирионы ЧМЖ имеют сложное строение. Они состоят из нуклеокапсида со спиральным типом симметрии, который окружен двухслойной липопротеиновой оболочкой - суперкапсидом. Липопротеиновая оболочка
- Київ+380960830922