2
ТЕРМИНАЛОГИЯ М СОКРАЩЕНИЯ.
ВЛК'РС - вирус лейкоза крупного рогатого скота.
ЕД - единица действия.
ИФА - иммуноферментный анализ.
РИД - реакция иммунодиффузии в геле агара.
ПЦР - полимеразная цепная реакция.
РВОВ - рекомбинантный вирус осповакцины.
BLV - bovine leukemia virus (вирус лейкоза крупного рогатого скота. FLK - культура клеток почки эмбриона овцы, хронически инфицированная вирусом лейкоза.
СС-81 - перевиваемая культура клеток эмбриона кошки, трансформированные вирусом саркомы мышей Молони.
ПО-ТК - мутантная по 5-бром 2 дезоксиуридину культура клеток почки овцы.
ПО-ТЮхСО - внутривидовая гибридная культура почки овцы со спленацитами овцы.
СПЭВ - культура клеток почки эмбриона свиньи.
М Д В К - культура клеток поч к и тел е и ка.
КСТ - культура клеток коронарных сосудов сердца теленка.
1ГГП - культура клеток тести кулов поросенка.
gp 51 - гликопротеид ВЛКРС с молекулярной массой 51 кДа.
Bat - линия клеток легкого летучей мыши, хронически инфицирован-
ная вирусом лейкоза.
ТСС - тест синцитиеобразования.
ЦТР - цитотоксическая реакция.
ОГЛАВЛЕНИЕ
1. Введение
2. Обзор литературы
2.1. Краткая историческая справка
2.2. Классификация ретровирусов
2.3. Вирус ВЛКРС
2.3.1. Строение, морфология и физико-химические свойства вируса
2.3.2. Структурные белки ВЛКРС
2.3.3. Геном и особенности репликации вируса
2.4. Клиническая картина и стадии лейкози о го процесса у крупного рогатого скота
2.5. Эпизоотология ВЛКРС
2.5.1. Распространение ВЛКРС
2.5.2. Спектр хозяев и пути передачи ВЛКРС
2.5.3. Методы диагностики
2.5.4. Прямые методы
2.5.5. Непрямые методы
2.5.6. Меры борьбы с ВЛКРС
2.6. Разработка специфических средств профилактики ВЛКРС- инфекции
3. Собственные исследования
3 1. Материалы и методы
3.1.1. 1 Іолучение инактивированной клеточно-ассоциированной вакцины против лейкоза крупного рогатого скота
3.1.2. Культуры клеток
3.1.3. Животные
15
лированных фитогемаглютинином при краткосрочном их культивировании.
Зрелые вирионы ВЛКРС круглой формы, диаметром 90-120 нм, с центрально расположенным электронно-плотным нуклеоидом, размером 40-90 нм, отделенным от окружающей его двухслойной мембраны, светлой зоной (Calafat J., Hademan Р., Ressang A., 1974).
Нуклеоид состоит из рибонукл со протеида, окруженного белковым капсидом. Наружная поверхность вириона несет гликопротеиновые выросты (шипики) длиной 10-12 нм (Miller J.M. et. al., 1969; CalafatJ. et al., 1974, 1977; Парфанович М.И, и др. 1974; Валихов А.Ф. с соавт., 1974, 1979; Жданов В. М. и соавт., 1974; Надточей Г.А., Валихов А.Ф. и др., 1976; Меньшикова З.Н., 1979). В составе вирионов обнаружено 68,5% белков, 35% липидов, 2,2% нуклеиновой кислоты и 0,5% углеводов (Kaaden О. et al., 1972; Kettmann R. et al., 1975). Значительное количество липидов, присутствующее в оболочке вириона ВЛКРС, обусловливает чувствительность к растворителям (эфиру, хлороформу, фосфолипазе) и низкую величину плавучий плотности (в градиенте сахарозы 1,13-1,18 г/см, в градиенте плотности метризамида 1,105-1,120 г/см) (Кукайн P.A., Нагаева Л.И. и др. 1974, 1979; Paulsen J. et al., 1976; Portetelle D. et al., 1976, 1977; McDonald N.C. et al., 1976).
2.3.2.Структурные белки ВЛКРС.
Методом электрофореза очищенных вирионов ВЛКРС в полиакриламидном геле с SDS и гельфильтрации в присутствии гуанидгидрохло-рида, выявлено, в составе вирионов 4 основных негликозилированных белка (р24, р 15, р12, р10) и 2 гликозшшрованных компонента (gp51 и gp30) (Bumy A., Bruck C., et al., 1980).
Внутренний структурный белок p24 был первым белком, выделенным из инфицированных клеток (Gilden R.V., Long C.W. et al., 1975; Devare
16
S.G. et a!., 1976; Miller J.M., Olson C., 1980) или из очищенных вирионов и изучен довольно подробно (Ferrer J. F., 1972; Miller J.M., Olson C., 1977). Он имеет молекулярную массу в пределах от 24000 до 25000Кд, нейтральный и умеренно гидрофобный, состоит из 215 аминокислот (Rice N. R., Stephens R. M., et al., 1985). По составу аминокислот он отличается от ко-ровых белков других ретровирусов, но имеет статистическое сходство с главным коровым белком HTLV (Oroszlan S., Sarngadharan M.G., et al., 1982). Между p24 ВЛКРС и p24 Т-клеточного лейкоза человека имеется статистически достоверная гомология (Bruck C., Rensonnet N., et al., 1984). Так же р24 ВЛКРС имеет общую антигенную детерминанту с внутренними белками вируса лейкоза-саркомы птиц, вирусов типа С мышей, хомяков и вируса типа D обезьян (вирус Мезон-Пфайзера) (Альтштейн А.Д. и др. 1980; Тарасишин Л.А. и др., 1980).
Р15 является слабым основным фосфолипидом и не содержит остатков метионина (Kaaden O.R., et al., 1977; Uckert W., 1986). В совокупности молекул pi 5, существует две популяции, одна - связана с липидным слоем, двухслойной мембраны вируса, другая- с вирусной РНК (Kaaden O.R., 1982; Uckert W., Hertling L. et al., 1984).
P10 является продуктом расщепления одной из фракций р 15, обладающий выраженными основными и гидрофобными свойствами, способными связываться с однонитевыми ДНК и РНК и р24 (Uckert W. et al., 1984, 1986), является основным компонентом РНП вириона (Long C.W., et al., 1980; Кукайн P.A., Нагаева Л.И., и др., 1981; Uckert W., 1986).
Kaaden О.R., et al. (1977) первыми выявили обратную транскриптазу, и тем самым представили доказательство того, что ВЛКРС - это ретровирус. Вирион ВЛКРС содержат от 50 до 100 молекул этого фермента (Мазу-ренко H.H., 1980) причем размер молекулы ОТ в градиенте глицерина в зависимости от концентрации солей варьирует от 70000 до 40000 Кд (Виту
A., et al., 1987).
- Київ+380960830922