ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ....................................................... 5
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ................................................... 12
1.1. Структурно-функциональный аспект {сепаративного остеогенеза... 12
1.2.Репаративная регенерация костной ткани............................ 14
1.3. Система кроветворения и факторы естественной резистентности... 29
1.4. Морфофункциональные изменения в системе гемо- иммуногенеза
в период репаративного остеогенезе.................................... 42
1.5. Иммуномодуляторы и репаративная регенерация костной ткани... 63
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ........................................... 68
2.1. Материалы и методы............................................... 68
2.1.1. Определение сывороточных факторов естественной резистентности.. 70 Бактерицидная активность сыворотки крови крыс......................... 70
Фагоцитарная активность гранулоцитов периферической крови крыс 71
Лимзоцимная активность сыворотки крови крыс........................... 71
2.1.2.0пределение клеточных факторов иммунитета....................... 72
В-лимфоциты периферической крови крыс................................. 73
Т-лимфоциты периферической крови крыс. .............................. 73
Теофиллинрезистентные клетки периферической крови крыс................ 74
Теофиллинчувствительные клетки периферической крови крыс 74
Фагоцитарная активность мононуклеаров периферической крови крыс.. 74
2.1.3. Гистологические исследования костной ткани..................... 75
Морфометрические исследования органов иммунногенеза................... 76
2.1.4. Клинические испытания иммунокорректоров на спонтанно травмированных собаках................................................ 77
2.1.5. Методы аспирационной биопсии кроветворных органов.............. 79
2.1.6. Схема лечебных мероприятий в посттравматический период 80
2.1.7. Методика выполнения накостного остеосинтеза.................... 80
2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.......................................... 82
2.2.1. Анализ показателей периферической крови и костного мозга крыс в
процессе репаративного остеогенеза.................................... 82
Эритрограмма травмированных крыс...................................... 82
Лейкограмма травмированных крыс....................................... 84
2
Миепограмма травмированных крыс....................................... 86
2.2.2. Факторы естественной резистентности периферической крови крыс.. 91 Бактерицидная активность сыворотки крови крыс......................... 91
Лимзоцимная активность сыворотки крови крыс........................... 92
Фагоцитарная активность гранулоцитов периферической крови крыс 93
2.2.3. Клеточные факторы естественной резистентности периферической
крови крыс............................................................ 94
Т-лимфоциты периферической крови крыс................................. 95
Теофиллинрезистентные клетки периферической крови крыс................ 96
Теофиллинчувствителъные клетки периферической крови крыс.............. 97
В-лимфоциты периферической крови крыс................................. 98
Фагоцитарная активность мононуклеаров периферической крови крыс 99
2.3. Теоретическое обоснование иммунокоррекции в процессе
репарации костной ткани.............................................. 102
2.4. Анализ показателей периферической крови и костного мозга крыс в процессе репаративного остеогенеза и иммунокоррекции полиоксидонием,
продигиозаном и миелопи дом.......................................... 117
Эритрограмма крыс под воздействием иммунокорректоров................. 117
Лейкограмма крыс под воздействием иммунокорректоров.................. 119
Миелограмма крыс под воздействием иммунокорректоров.................. 123
Бактерицидная активность сыворотки крови............................. 128
Лизоцимная активность сыворотки крови................................ 129
Фагоцитарная активность гранулоцитов крови........................... 131
Т-лимфоциты периферической крови..................................... 133
Теофиллинрезистентные клетки периферической крови.................... 135
Теофиллинчувствителъные клетки периферической крови.................. 137
В-лимфоциты периферической крови..................................... 139
Фагоцитарная активность мононуклеаров периферической крови 141
3. СТРУКТУРНЫЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ ОРГАНОВ ИММУНОГЕНЕЗА В ОРГАНИЗАЦИИ РЕПАРАТИВНОГО ОСТЕОГЕНЕЗА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ........................................... 145
3.1. Морфофункциональная характеристика лимфатических узлов крыс в период репаративной регенерации костной ткани под воздействием
иммунокорректоров различных классов.................................. 145
Динамика Тлимфоцитов................................................. 146
Динамика В- лимфоцитов............................................... 147
3.1.1.Анализ количественных показателей клеточного состава регионарных
лимфатических узлов крыс в период репаративного остеогенеза.......... 149
А денограмма крыс.................................................... 150
3
обладают наибольшим флогогенным потенциалом, в сравнении с другими клеточными элементами (Осипенко A.B., Базарный В.В. с соавт., 1991). Нейтрофил обладает арсеналом гидролаз, для каждой из которых можно подыскать мишень во внеклеточном пространстве. Продукты расщепления, получаемые при участии протеолитических гидролаз, могут использоваться в качестве субстрата другими ферментами. В этом смысле комплекс протеиназ, высвобождающихся из нейтрофилов, представляет своеобразную мультиферментную систему, объединённую единым функциональным планом (Маянский А.Н., Галиулин А.Н., 1984).
Нейтрофилам как самой обширной группе, принадлежит едва ли не самая важная роль в клеточной защите организма - фагоцитоз. Установлено, что фагоцитарная и бактерицидная активность нейтрофилов значительно выше таковой у моноцитов и макрофагов (Coonrod J., 1988; Resnitzky Р., Saft D. et al., 1994). Эта активность опосредована целым рядом рецепторов, контролирующих различные этапы данного процесса (Downey G., 1994). Наряду с фагоцитозом, они принимают участие в регуляции межклеточных взаимодействий и способны оказывать существенное влияние на мононуклеарные клетки (Cempbell P.A., Mucke L., 1993; Szabo G., Mandrecar P. et al., 1994). Лизосомальные гранулы нейтрофила содержат широкий спектр белковых факторов, в том числе лизоцим (Забиров И.Ш., Абедев Х.Б., 1972), содержащийся в значительном количестве. Этот фермент является важным фактором антимикробной защиты в крови и внешних секретах, а также обладает многообразной иммунорегуляторной и гомеостатической функциями (Прияткин С.А., 1999).
Моноциты - популяция иммунокомпетентных клеток, являющаяся основой всей системы мононуклеарных фагоцитов, включая в себя как собственно моноциты, так и их производные - тканевые (клетки Лангерганса, звездчатые ретикулоциты, альвеолярные макрофаги и др.) макрофаги (Фрейдлин И.С., 1984; Маянский А.Н., Пикуза О.И., 1993; Rabinovitch М., 1995). Моноциты принимают участие практически на всех стадиях
38
иммунного ответа, способны секретировать ферменты, связывать и адсорбировать тромбоциты, покрытые антителами, синтезировать и транспортировать ферритин. Они активны в отношении внеклеточных белков (эластаз, коллагеназ, лизосомальных протеаз) и являются активаторами плазминогена, экстраренального эритропоэтина, тромбоспондина. Наряду с гранулоцитами, также являются регуляторами грануломонопоэза и фактором, активирующим тромбоциты. Моноциты занимают важное место в регуляции гемостаза, гемопоэза, разрушении и элиминации гибнущих клеток (Учитель И.Я., 1978; Алмазов В.А., 1979, Маянский Д.Н., 1981; Фрейндлин И.С., 1984). В отличие от нейтрофилов, где в процессе фагоцитоза происходит полное расщепление антигенного материала, моноциты (макрофаги) разрушают его с сохранением антигенных детерминант, информация о которых, с помощью мембранных 1а - антигенов, передается лимфоцитам (Медуницин Н.В., Литвинов В.И. с соавт., 1980; Войтенков Б.О., Окулов В.Б., 1995). Одновременно с регуляцией иммуногенеза мононуклеарные фагоциты играют важную роль в процессе гранулоцитопоэза (Дыгай А.М., Шахов В.П., 1989; Карканица Л.В. с соавт. 1990; Клишов М.Г. с соавт., 1994; Koeffler Н.Р., Gasson J. et al., 1988; Hannum C., Wilcox C. et al., 1990). Подобно лимфоцитам, они инактивируют токсины. В очаге повреждения моноциты могут трансформироваться в макрофаги и фибробласты (Van Furth R., 1988, Roske
A., Lipsky P., 1989).
В рыхлой соединительной ткани различается группа активно фагоцитирующих клеток - макрофагов. Основываясь на их функции, морфологических признаках и происхождении из общей стволовой кроветворной клетки они были объединены в единую систему мононуклеарных фагоцитов (СМФ) (Van Furth R. et al., 1973). Клетки, входящие в СМФ, отличаются по ультраструктуриым, цитохимическим и функциональным свойствам, по способности к пролиферации, наличию поверхностного "антигена дифференцировки" (Чертков И.А., Фриденштейн
А.Я., 1977, 1984). Существуют также структурно-функциональные и
39
- Київ+380960830922