2
СОДЕРЖАНИЕ
Стр.
1. Введение 4
2. Обзор литературы 13
2.1. Общая характеристика заболевания 13
2.2. Методы диагностики туберкулёза у животных 14
2.2.1. Аллергический метод 14
2.2.2. Серологический метод 18
2.2.3. Патологоанатомический метод 20
2.2.4. Бактериологический метод 21
2.2.5. Молекулярно-генетический метод. Полимеразная цепная 27 реакция при диагностике туберкулёза животных и человека
2.3. Туберкулёз коз 43
3. Собственные исследования 46
3.1. Материалы и методы 46
4. Результаты исследования 59
4.1. Исследование «Туберкулина очищенного (ППД) для 59 млекопитающих» производства ФГУП «Курская биофабрика»
- фирма БИОК на наличие возбудителя М.Ымб и ДНК М.Ьоу1я
4.2. Сравнительное изучение чувствительности и специфичности 64 ПЦР-тест-систем разных производителей
4.3. Изучение диагностической ценности ПЦР-тест-систем четырёх 69 производителей при исследовании биоматериалов от крупного рогатого скота
4.4. Изучение диагностической ценности ПЦР при диагностике 73 туберкулёза у экспериментально заражённых разными видами микобактерий коз
4.4.1. Исследование лабораторных животных, находивщихся в 86
контакте с заражёнными разными видами микобактерий
3
козами
4.5. Исследование патматериала от лабораторных животных 88
методом ПЦР тест-системами разных производителей
4.6. Исследование объектов внешней среды тест-системами 93
четырёх производителей.
5. Обсуждение полученных результатов 98
6. Выводы 111
7. Практические предложения ИЗ
8. Список использованной литературы 114
9. Приложение 154
14
Болезнь у животных вызывают микобактерии туберкулёза бычьего (М.Ьоу!$), человеческого (МЛиЬегси1о51з) и птичьего (М.аушт) видов. Каждый из них патогенен для животных соответствующего вида или человека, возможно и перекрёстное заражение.
Микобактерии туберкулёза бычьего вида (М.Ьоу1$) являются основным возбудителем туберкулёза крупного рогатого скота. Однако, они патогенны и для других домашних и диких жвачных животных, человека и других приматов, плотоядных животных, морских свинок и кроликов, а также для попугаев.
Микобактерии туберкулёза человеческого вида (МДиЬегси1оз15) — основной возбудитель туберкулёза человека, но патогенен и для других приматов, собак, кошек, попугаев и некоторых других животных. Малопатогенен для кроликов, коз и обуславливает в основном сенсибилизацию их организма к туберкулину.
Микобактерии птичьего вида (М.аушт) патогенны для всех домашних и диких птиц, особенно для кур, индеек, цесарок, а из лабораторных животных слабопатогенны для кролика; не патогенны для морских свинок. У человека, заражённого этим видом возбудителя, иногда могут быть клинические формы лимфаденитов, нередко с тяжёлым течением.
2.2. Методы диагностики туберкулёза у животных
При диагностике туберкулёза у животных используют эпизоотологический, клинический, патологоанатомический, гистологический, бактериологический, аллергический и молекулярно-генетический (полимеразная цепная реакция - ПЦР) методы исследования.
2.2.1. Аллергический метод
В соответствии с международным ветеринарным кодексом МЭБ (2002) в нашей стране основным методом прижизненной диагностики туберкулёза у
15
крупного рогатого скота является аллергическая туберкулиновая проба (туберкулинизация).
Аллергический метод диагностики туберкулёза с применением туберкулина выявляет инфицированных возбудителем туберкулёза и сенсибилизированных другими видами микобактерий животных.
Основным методом исследования млекопитающих животных (за исключением лошадей, овец, коз и пушных зверей) и птиц была и остаётся внутрикожная туберкулиновая проба. Для аллергической диагностики туберкулёза у млекопитающих используют ППД-туберкулин для млекопитающих, у птиц - ППД-туберкулин для птиц.
В начале 60-х годов за рубежом и в нашей стране при аллергической диагностике туберкулёза крупного рогатого скота стали выявляться реагирующие на туберкулин животные, у которых при патологоанатомическом осмотре и лабораторном исследовании не удавалось подтвердить наличие туберкулёза (М.К. Юсковец, 1965; П.И. Кокуричев, 1973;
Н.П.Овдиенко, 1983, 1999; В.П. Урбан с соавт., 1985; В.И. Ротов с соавт., 1973, 1978; В.Е. Щуревский с соавт., 1985; А.И.Кузин, 1987, 1992; А.Н. Шаров, 1989, 1990, 1995; А.Х. Найманов с соавт., 1993, 2002, 2004; A. Spryzak, C.Zorawski, 1970; W.Kostrzenski et al., 1978; R.Urbanczik, K.Petersen, 1985; A. Kalk et al., 1992). Такие реакции впоследствии стали называть «ложными» или «неспецифическими». Проявление неспецифических реакций в разных стадах составляет от 1 до 10%, а в некоторых стадах отдельных регионов может достигать 50% и выше.
Проблема выявления неспецифических реакций в Российской Федеарции увеличивается с каждым годом. Так, в 2001 г. всего было выявлено реагирующих животных 103720 голов, из них в неблагополучных пунктах -13543 (13%), в благополучных стадах - 90177 (87%); в 2002 г. - выявлено реагирующих всего 93467 голов, из них в неблагополучных пунктах - 6595 (7%), в благополучных -86872 (90,3%); в 2003 г. - выявлено реагирующих всего 93688 голов, из них в неблагополучных пунктах - 12322 (13,2%), в
- Київ+380960830922