Иммунобиологические свойства вируса ящура типа Азия-1, штамм ь 1987/амурский/2005, и усовершенствование диагностических тест - систем

2
ОГЛАВЛЕНИЕ
Стр.
1. Введение 6
2. Обзор литературы 14
2.1. Общие сведения о ящуре 14
2.2. Эпизоотическая ситуация по ящуру 15
2.3. Вирус ящура 16
2.4. Биологические особенности вируса ящура типа Азия-1. 18
2.5. Антигенная вариабельность и родство вируса ящура. 19
2.6. Основные методы лабораторной диагностики ящура. 25
2.7. Профилактика. 37
2.8. Заключение по обзору литературы. 41
3. Собственные исследования 44
3.1. Материалы и методы 44
3.1.1. Материалы 44
3.1.1.1. Вирусный материал 44
3.1.1.2. Вакцина 44
3.1.1.3. Подопытные животные 44
3.1.1.4. Культуры клеток и питательные среды 45
3.1.1.5. Сыворотки крови 46
3.1.1 .б.Оборудование, химические реактивы, растворы 46
3.2. Методы исследования 48
3.2.1. Выделение вируса ящура 48
3.2.2. Культивирование вируса ящура в клеточных культурах 48
3.2.3. Серологические реакции 49
3.2.4. Титрование вируса ящура 50
3.2.5. Подготовка контрольных штаммов вируса ящура для определения иммуногенной активности противоящурной вакцины на морских свинках 50
3.2.6. Определение иммуногенной активности
з
противоящурных вакцин 52
3.2.7. Получение штаммоспецифических препаратов. 52
3.2.8. Статистическая обработка результатов. 54
4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 55
4.1. Изучение нммунобиологческих свойств штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005 55
4.1.1. Выделение и идентификация вируса ящура из патологического материала. 57
4.1.2. Выделение вируса ящура в культурах клеток. 59
4.1.3. Биологические свойства вируса ящура штамма Азия-1
№1987/Амурский/2005. 59
4.1.3.1. Адаптация и культивирование вируса ящура клеточных культурах. 59
4.1.3.2. Адаптация и титрование вируса ящура на морских свинках. 62
4.1.4. Получение штаммоспецифических диагностических компонентов для РСК. 64
4.1.5. Получение диагностических компонентов для ИФА. 67
4.1.6. Изучение антигенного родства штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005. 68
4.1.6.1. Изучение антигенного родства с помощью РСК. 68
4.1.6.2. Изучение одностороннего антигенного родства в
РМН и ИФА. 70
4.1.7. Сравнительная оценка иммуногенной активности противоящурных вакцин. 74
4.1.8. Результаты изучения иммуногенной активности вакцины противящура сорбированной трехвалентной
типов А, О, Азия-1. 77
4.2. Разработка метода выявления антигена вируса
ящура в ИФА. 80
12
региональной конференции посвященной проблеме профилактики и лечения домашних животных и птицы. - Владимир, 2001; международной научной конференции, посвященной 45-летию ФГУ «ВНИИЗЖ» «Актуальные проблемы инфекционной патологии животных» г. Владимир, 2003г.; 2-й международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы зоотехннической науки и практики, как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья сельскохозяйственных животных», г. Ставрополь, 2003г.; 6-ом международном конгрессе ветеринарной вирусологии «Эволюция и персистенция вируса» прошедшем в Сант-Мало, Франция в 2003 году; международной научной конференции молодых ученых «Проблемы мониторинга и генодиагностики инфекционных болезней животных» г. Владимир, 2004.
«Набор для выявления антигена вируса ящура в пробах материала иммуноферментным анализом» был представлен на выставке продукции ФГУ ВНИИЗЖ, при проведении Всероссийского научно-практического семинара-совещания ветеринарных специалистов «Эпизоотологический мониторинг, профилактика и меры борьбы с болезнями КРС и свиней» 26-30 сентября 2005г., г. Владимир.
Основные положения диссертации были изложены на заседаниях ученого совета ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных».
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 135 страницах, включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, список использованной литературы, практические предложения и приложения. Список литературы включает 156 источников, из них 63 источника иностранных авторов. Работа иллюстрирована 20 таблицами, 3 рисунками. В приложении к диссертации имеется 4 документа, подтверждающих результаты исследований и их внедрение.
13
Автор выражает искреннюю благодарность сотрудникам лаборатории «Ящура и везикулярных болезней», лаборатории «Биотехнологии», лаборатории «Диагностики особо опасных болезней животных», Отделу биологического и технологического контроля, научной библиотеке ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» за практическую помощь и методические советы при выполнении и оформлении диссертации.