ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 3
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Характеристика вируса лейкоза крупного рогатого скота 8
1.2 Динамика репродукции вируса лейкоза крупного рогатого скота в
клеточных культурах. 15
1.3 Методы выявления инфицированных вирусом лейкоза животных 19
1.4 Передача вируса лейкоза крупного рогатого скота в естественных условиях и в эксперименте 30
1.5 Предрасполагающие факторы развития лейкозного процесса у 37 крупного рогатого скота.
1.6 Иммунитет и специфическая профилакгика лейкоза круї іного рогатого скота 41
1.7 Заключение 47
2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материал и методы исследования 51
2.2 Результаты собственных исследований
2.2.1 Изучение эпизоотической ситуации по лейкозу КРС в хозяйствах Стерлитамакского района и сравнительная характеристика показателей миелограммы РИД^ отрицательных иммунодефицитных и РИД(+} положительных иммунодефицитных коров-матерей. 72
2.2.2 Персистенция антител инактивированного вируса лейкоза
в организме вакцинированных коров-матерей и телят. 108
2.2.3 Изучение в опытах инфекционных свойств молока от больных лейкозом коров. 111
2.2.4 Экономическая эффективность профилактических, оздоровительных, противолейкозных мероприятий в хозяйствах Стерлитамакского района. 113
3 ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РУЗУЛЬТАТОВ 118
ВЫВОДЫ 125
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 127
БИБЛИОГРАФИЯ 128
з
ВВЕДЕНИЕ
Лейкоз крупного рогатого скота причиняет существенный экономический ущерб сельскохозяйственному производству, который складывается из гибели, вынужденного убоя больного скота, недополучения приплода, снижения продуктивности, нарушения процессов
воспроизводства.
В последние годы внимание исследователей уделяется вопросам эпизоотологии, патогенеза, инфекционных свойств возбудителя, диагностики и профилактики лейкоза крупного рогатого скота.
Многочисленные публикации и данные официальной ветеринарной статистики свидетельствует о том, что среди инфекционных болезней крупного рогатого скота лейкоз по тяжести поражения органов, тканей, массовости проявления и экономическим последствиям занимает лидирующее место и составляет 57% от других нозологий (Гулюкин М.И., 2003).
Широкое распространение заболевания во многих странах мира, отсутствие средств терапии и специфической профилактики определяют актуальность темы и выдвигают проблему лейкоза крупного рогатого скота в число сложных задач не только ветеринарии, но и биологии в целом (Левашев А.Т., 1994; Незавитин А.Г., 1995; Галеев Р.Ф., 2000; Петров Н.И., 2005; Храмцов В.В.,2005).
Для эффективной борьбы с лейкозом крупного рогатого скота показано использование специфических средств профилактики на основе инактивированного вируса (Miller et al., 1983, Парфанович М.И. и др., 1987; Бурба Л.Г и соавт., 1985; Федорова Н. А и соавт., 1987; Крикун В.А и соавт., 1996; Галеев Р.Ф., 2000).
Однако, проведенные ранее исследования по вакцинации телят позволяли создать высокие титры антител после трехкратной вакцинации, но не защищали от инфекции вируса лейкоза при экспериментальном заражении (Парфанович М.И и соавт., 1980,1981; Парфанович М.И и соавт., 1983).
14
идентифицируют два различных антигенных сайта на молекуле белка (Bruck С et al., 1983). В сыворотке инфицированных животных содержатся антитела к этим эпитопам.
Белок р15- слабый основной белок, не содержащий остатки метионина. Он является главным фосфопротеидом вирионов ВЛКРС (Uckret, Н. Wunderlich, 1979), и, как установлено в опытах по сшивке белков химическими реагентами, совокупность молекул р15 представлена двумя разновидностями: одни молекулы связаны с липидным слоем двухслойной мембраны вируса, другие - с вирусной РЖ (Uckert и др., 1983).
Белок р12 - основной белок с высоким содержанием остатков глицина и пролина, и, следовательно его молекула имеет низки уровень вторичной организации. Опыты по сшивке химическими веществами показали, что р12 в вирионе тесно связан с вирусной РЖ (Uckert и соавт.,1983; Bignon, J.D., 1990;). Сравнение последовательностей аминокислот белка р12 с продуктом нуклеотидных последовательностей гена gag, клонированного из провируса клеток опухоли, показало, что р12 располагается на СООН - конце первичного транспортированного продукта гена gag. Также показана минимальная изменчивость последовательностей р12 из двух изолятов ВЛКРС. Такой минимальный генетически дрейф среди независимых изолятов дает доплнительное подтверждение гомологии, установленной между р12 ВЖРС и р15 HTLV (Oroszlan et al., 1983; Dusinsky R., 1987; Davies C.J., 1991).
По аналогии с другими ретровирусами ВЛКРС должен содержать трансмембранный белок кодируемый геном env. В1984 Schults с соавт, используя метод разделения вирусных белков на пористом стекле с последующей хроматографией в обратной фазе, выделил два белка оболочки ВЖРС -gp60 и рЗО. Антисыворотка, полученная против gp60, реагировала так же с гликопротеидом с молекулярной массой 51-52 кД.
15
Впервые выявленный рЗО отличается gp30 ВЖРС и обладает высокой гомологией с трансмембранными белками ретровирусов В- и С - типа, а так же с 3- областью env гена вируса Т- клеточного лейкоза человека.
Внутриклеточные предшественники белков вирионов ВЖРС были выявлены иммунопреципитацией сыворотками определенной специфичности к экстрактам клеток, инфицированных ВЖРС (Немейкайте, А. Й., 1990; Ghysdael et al., 1978; Cohn, М. Т., 1978; Mamonn et al., 1983) или ооцитов Xenopus Iaevis, инъецированных 38S РНК ВЖРС (Ghysdael et al., 1979).
Во всех случаях выявляли два полипептида с молекулярной массой 70кД (Pr 70gag) и 45кД (Pr 45gag), которые являются предшественниками р24, р15, р12 и рЮ. Недостаточно ясна зависимость между Pr 70gag и Pr 45gag; несмотря на то что метионинсодержащие пептиды Pr 45gag имеются в Pr 70gag, все же маловероятно , что Pr 45gag происходит из Pr 70gag в результате протеолитического расщепления, поскольку соотношение Pr 70gag/Pr 45gag в инфицированных клетках остается одинаковым независимо от времени введения пульс - метки и не изменяется при метке клеток в присутствии аминокислотных аналогов, которые явно ингибируют дальнейшее протеолитическое расщепление.
Кроме того, оба Pr 70gag и Pr 45gag, синтезированные в лизатах ретикулоцитов по программе ВЛКРС 38S РНК, содержатся в таком же соотношении что и в инфицированных ВЛКРС клетках (Ghysdael et al., 1979 Немейкайте, А. Й., 1990).
По-видимому, Pr 70gafi и Pr 45gag синтезируются независимо, возможно, на различных популяциях 38S и РНК.
1.2 Динамика репродукции вируса лейкоза крупного рогатого скота в культурах клеточных культурах
Вирус лейкоза впервые удалось обнаружить в краткосрочных культурах лимфоцитов крови инфицированных животных (Miller et al.,
- Київ+380960830922