ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект и методы исследования
Наблюдения проведены в период 2000 - 2002 гг. на кафедре детской гастроэнтерологии Харьковской медицинской академии последипломного образования на базе гастроэнтерологического отделения г. Харькова при 19-й детской клинической больнице (главный врач Н.А. Можаева). Гистологические исследования проводились в патоморфологической лаборатории кафедры патологической анатомии (зав. - проф. В.Д. Садчиков), ирригографические - в рентгенологическом кабинете 19-й детской клинической больницы при консультативном участии кафедры детской рентгенологии (зав. - проф. М.И. Спузяк) указанной академии.
Обследовано 110 детей с хроническими заболеваниями толстой кишки в возрасте от 7 до 14 лет и 10 практически здоровых детей, составивших контрольную группу. Все больные находились на стационарном обследовании и лечении в городском гастроэнтерологическом отделении и поступили в стационар в периоде обострения заболевания. Диагноз синдрома раздраженного кишечника формулировался в соответствии с классификацией Weber F.H., McCallum R.W. (204); диагноз хронического неязвенного колита - по классификации Б.Г. Апостолова, модифицированной А.Н. Даниловым (38).
Основной метод нашего исследования - анализ клинико-лабораторных и инструментальных наблюдений. Все дети подвергались тщательному клиническому обследованию, позволившему установить предварительный диагноз и определить тяжесть состояния больного ребенка. Функциональное состояние вегетативной нервной системы оценивалось по классификации А.М. Вейна. Оценивались исходный вегетативный тонус (с помощью таблиц А.М. Вейна, модифицированных для детского возраста), вегетативная реактивность (путём исследования рефлекса Даньшина-Ашнера и солярного рефлекса), вегетативное обеспечение деятельности (на основе реакции артериального давления и частоты сердечных сокращений при выполнении клиноортостатической пробы).
Проводилось исследование анализов крови, мочи, кала. Наряду с клиническим анализом кала, проводилось расширенное копрологическое исследование, которое включало в себя определение физико-химических свойств кала и микроскопическое его исследование. Проводились качественные реакции с уксусной и трихлоруксусной кислотами на наличие в кале растворимого белка (реакция Трибуле-Вишнякова). За норму принимались показатели, полученные у 10 практически здоровых детей: цвет - коричневый, консистенция - оформлен, запах - фекальный, рН кала - 6,2-7,7, содержание нейтрального жира - "?", содержание жирных кислот и мыл - "?", содержание крахмала - "?", содержание мышечных волокон -"?", содержание соединительно-тканных волокон "?", содержание клетчатки переваримой - "?", непереваримой - "++", содержание слизи "?", содержание лейкоцитов - "?". Реакция Трибуле-Вишнякова оценивалась по степени просветления исследуемой жидкости по сравнению с контрольной - в норме - слабоположительной ("+").
Ректороманоскопическое исследование проводилось с помощью ректороманоскопа РД-1. Для большей информативности результатов проводилась предварительная подготовка, включающая назначение децитела по 1 таблетке 3 раза в день во время еды или эспумизана по 2 капсулы или 2 чайные ложки эмульсии 3 раза в день накануне и 2 капсулы или 2 чайные ложки эмульсии утром в день исследования, а также очищение кишечника с помощью клизм, проводимых накануне и в день исследования не позднее, чем за 2 часа до его начала. Больной устанавливался в коленно-локтевом положении, прогнув спину в положении лордоза. Перед проведением ректороманоскопии для оценки тонуса сфинктера, исключения трещин заднего прохода, определения возможности свободного прохождения тубуса ректоскопа в ампулу прямой кишки проводилось пальцевое исследование. Затем тубус ректоскопа, закрытый обтуратором и смазанный предварительно смягчающей мазью, вводился в прямую кишку. После удаления обтуратора к тубусу присоединялась осветительная часть и дальнейшее продвижение проводилось под контролем зрения в положении просвета. Осмотр слизистой оболочки начинался во время выведения прибора из кишки. При этом слегка кругообразно поворачивался конец ректоскопа с последовательным осмотром кишечной стенки. Перед извлечением тубуса из ампулы прямой кишки, несколько присев и опуская рукоятку прибора, исследовалась задняя (дорсальная) стенка кишки, после чего тубус извлекался из кишечника.
Во время проведения эндоскопического исследования производилась биопсия кишечной стенки с последующим морфологическим исследованием фрагмента слизистой оболочки. Взятие биоптата через ректоскоп осуществлялось щипцами, имеющими на концах острые ложечки диаметром 2-3 мм (щипцы Брюнинга). Фрагмент ткани отсекался под контролем глаза. Для исследования выбирался выпячивающийся в просвет кишки участок слизистой оболочки. При взятии биопсионного материала фрагмент СО толстого кишечника отсекался в пределах собственно мышечной пластинки. В большинстве случаев забор биопсионного материала производился из задней стенки толстой кишки в 15-20 см от анального отверстия. Место взятия биоптата чётко указывалось при описании эндоскопической картины. Перед извлечением тубуса ректороманоскопа участок, где проводилась биопсия, вновь осматривался и, при необходимости, смазывался кровоостанавливающим раствором.
Биоптаты слизистой оболочки кишки, взятые на глубине 15-20 см из сигмовидной кишки, фиксировались в 10 % водном растворе формалина, забуференном по Ли, и заключались в парафин. Гистологические препараты окрашивались гематоксилин-эозином, альциановым синим при рН=1,0 и 2,5 с помощью Шик-реакции и, в части случаев, пикрофуксином по Ван Гизон. С помощью окуляр-микрометра измерялась толщина слизистой оболочки базальной мембраны покровного эпителия и высота последнего. Для определения относительной площади кишечных крипт использовалась окулярная сетка Г.Г. Автандилова.
Для определения степени атрофических изменений слизистой оболочки использовался показатель, условно обозначенный как индекс атрофии (ИА - Садчик
- Київ+380960830922