РОЗДІЛ 2
МАТЕРІАЛ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
2.1. Напрямок дослідження
Для розв’язання поставлених задач на базі Тернопільської обласної дитячої
клінічної лікарні та консультативно-лікувального центру Тернопільської
державної медичної академії ім. І. Я. Горбачевського комплексно обстежено 95
дітей з цукровим діабетом І типу у віці 5-15 років та 15 практично здорових
дітей аналогічного віку. У 23 хворих на ЦД із зниженням МЩКТ різного ступеня
тяжкості, через рік було проведено повторне обстеження, з них у 16 пацієнтів
після терапії, спрямованої на корекцію порушень МЩКТ (комплекс вітаміну Д3 та
гліцерофосфату кальцію) і у 7 дітей, які вказане лікування не отримували.
Крім загальноприйнятих при цукровому діабеті клінічних та додаткових обстежень,
які включали збір та аналіз скарг, вивчення анамнезу життя та захворювання,
об’єктивний огляд, консультації офтальмолога, невропатолога, ортопеда,
загальний аналіз крові, сечі, визначення рівня глікемії та добової глюкозурії,
загального білка, білірубіну, холестерину, амілази, b-ліпопротеїдів, АлТ, АсТ в
сироватці крові, ультразвукове дослідження органів черевної порожнини,
застосовували наступні методи вивчення стану кісткової системи:
1.Проводилась оцінка мінеральної щільності кісткової тканини за допомогою
двофотонної рентгенівської денситометрії.
2.Досліджувався рівень загального та іонізованого кальцію і неорганічного
фосфору в крові, їхня добова екскреція з сечею.
3.Визначались показники резорбції кісток - вільна фракція оксипроліну, кисла
фосфатаза та їх формування - лужна фосфатаза в сироватці крові.
2.2. Методики дослідження
Для кількісної оцінки МЩКТ використовували найкращий сучасний метод
дослідження-двофотонну рентгенівську денситометрію. Ця технологія забезпечує
надзвичайну швидкість та високу точність вимірів, фіксує мінімальні кількісні
зміни кісткової маси [2, 5, 101]. Нами застосовувався двофотонний
рентгенівський денситометр DРХ-А фірми "LUNAR Corp." (США). Сканування
проводилось на рівні 1-4 поперекових хребців у режимі "Pediatric", в
горизонтальному положенні дитини, тривало близько 5 хв, пацієнт отримував дозу
опромінення 0,96 mrem [101]. Результати сканування за допомогою спеціальної
комп’ютерної програми порівнювались з аналогічними показниками здорових дітей
європейської раси відповідного віку, статі, маси і зросту з наступним
формуванням показника Age Matched, який включає мінеральну насиченість кожного
поперекового хребця і в середньому для L1-L4, виражену у відсотках по
відношенню до вікового стандарту з урахуванням статі, маси і віку, та
відхилення від цього стандарту в умовних величинах (стандартне відхилення або
Z-критерій), яке визначається для кожного хребця окремо і в середньому для
L1-L4. При цьому узагальнена оцінка стану МЩКТ проводиться за найбільш зміненим
хребцем. За рекомендаціями ВООЗ при відхиленні Z-критерію від
середньостатистичної величини на -2,5 стандартних відхилень і більше говорять
про остеопороз, на -2,1-(-2,4) - остеопенію ІІІ ст., -1,6-(-2,0) - остеопенію
ІІ ст., -1,1-(-1,5) - остеопенію І ст. При коливаннях Z-критерію у межах ±1
стандартного відхилення МЩКТ вважають віковою нормою [103].
Крім Age Matched денситограма включає і інші показники, які характеризують
фактичний стан кісткової тканини дитини, яка обстежується:
1. BMD (Bone mineral density) - фактичний вміст мінералів в грамах на 1 см2
кожного поперекового хребця окремо і в середньому для L1-L4.
2. ВМС (Bone mineral content) - загальний фактичний вміст мінералів в грамах в
кожному поперековому хребці окремо та сумарно для L1-L4.
3. Ширина (Width) в см кожного поперекового хребця окремо та сумарно для L1-L4.
4. Висота (Height) в см кожного поперекового хребця окремо та сумарно для
L1-L4.
5. Площа (Area) в см2 кожного поперекового хребця окремо та сумарно для L1-L4.
Оброблені і скомпоновані результати денситометрії кожної дитини друкують на
окремій карті, взірець якої додається (додаток А).
Кальцій необхідний для мінералізації кістки, сприяє збільшенню пікової маси
кісткової тканини, має певний антирезорбтивний потенціал. Рівень загального
кальцію в крові та його добову екскрецію з сечею визначали за допомогою
трилонометричного титрування у присутності мурексиду, який утворює в лужному
середовищі з іонами Са комплексні сполуки рожево-фіолетового забарвлення
[230].
Фізіологічно найважливішою фракцією є іонізований кальцій, саме його вміст
найчастіше знижується при ендокринному остеопорозі [4, 118]. Рівень
іонізованого кальцію в сироватці крові визначали розрахунковим методом за
допомогою формули
де Саі - іонізований кальцій (ммоль/л);
Са - загальний кальцій (ммоль/л);
Б - вміст в крові загального білка (г/дл) [119].
Обмін кальцію в організмі тісно пов’язаний з метаболізмом неорганічних
фосфатів. Відомо, що гіперфосфатемія викликає
гіпокальціемію за рахунок пригнічення кальцитоніном секреції ПТГ. Для
визначення неорганічного фосфору в крові та добовій сечі застосовувався
уніфікований метод по відновленню фосфорно-молібденової кислоти аскорбіновою
кислотою до молібденового синього з наступною фотометрією [230].
Оксипролін не міститься ні в яких білках організму, крім колагену, і тому є
специфічним маркером та чутливим індикатором його катаболізму. Колаген І типу
складає близько 95 % остеоїду, і при посиленні процесів руйнування кістки
підвищується рівень його метаболітів, зокрема оксипроліну, у біологічних
середовищах організму. Ми вивчали рівень вільної фракції оксипроліну в
сироватці крові методом Stegemann у модифікації Осадчук М.А. та співавт. [25,
113, 2
- Київ+380960830922