РАЗДЕЛ 2
ОБЪЁМ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
В основу работы положены наблюдения за детьми, страдающими геморрагическим
васкулитом, которые поступали на обследование и лечение на протяжении 1995-2000
гг. в гематологическое отделение ГДКБ № 16 г. Харькова. Всего под наблюдением
находилось 88 детей в в возрасте от 1-15 лет, в том числе мальчиков – 53,6%,
девочек - 46,4%. В процессе наблюдения, проводилось общеклиническое
исследование, исследование системы гемостаза, гормональный статус, исследования
калликреин - кининовой системы и системы протеиназ. Были отмечены изменения
иммунологических показателей и показателей гормонального статуса, калликреин –
кинин - протеазной системах.
Иммунологические методы выполнены в иммунологической лаборатории кафедры
факультетской педиатрии Харьковского государственного медицинского университета
(ХГМУ). Исследования гормонального профиля проведены в радиоизотопной
лаборатории Института Охраны здоровья детей и подростков АМН Украины г.
Харькова и в Центральной Научно-исследовательской Лаборатории ХГМУ.
Исследование калликреин - кининовой системы - в лаборатории Института терапии
АМН Украины. Формулируя диагноз ГВ, использовали принятую в клинике рабочую
классификацию, которая представляет собой комплексный подход к оценке
клинической картины и течению заболевания с учетом остроты патологического
процесса [14, 15, 16, 17, 18, 54]. Согласно данной классификации, выделяли
простую (кожную) и смешанную (различное сочетание клинических синдромов:
кожного, суставного, абдоминального и почечного). По продолжительности течения:
острое или циклическое (до 2-х месяцев), затяжное (до 6 месяцев), хроническое
рецидивирующее или волнообразное течение (более 6 месяцев). По тяжести
заболевания – легкая, средней тяжести, тяжелая степень, молниеносное течение.
При постановке клинического диагноза и установлении формы ГВ учитывали
выраженность геморрагического синдрома и вовлечение в патологический процесс
поражение суставов, слизистой оболочки брюшины, а также поражение почек с
наличием характерных изменений в клиническом анализе мочи в виде гематурии,
протеинурии, цилиндрурии и др.
При наличии у больных абдоминальной формы ГВ, формирования
посткапилляротоксического гломерулонефрита мы учитывали в постановке диагноза
развитие осложнений заболевания: аппендицит, перитонит, перфорация,
инвагинация, желудочно-кишечное кровотечение, тромбоцитопатия потребления,
постгеморрагическая анемия и др.
Методы исследования включали в себя тщательный анализ результатов анамнеза,
лабораторных (общеклинических анализов крови и мочи, анализ биохимических,
иммунологических, радиоиммунологических, инструментальных: ЭКГ, УЗИ почек и
органов брюшной полости, сердца; рентгенографию органов грудной клетки и др.
показателей. По необходимости больных ГВ консультировали смежные специалисты:
нефролог, хирург, отоларинголог, невропатолог, кардиоревматолог и др.
Клинические исследования крови и мочи проводили общепринятыми методами;
протеинограмму крови определяли методом горизонтального электрофореза.
Содержание электролитов (калия, натрия) в плазме и эритроцитах измеряли
пламенной фотометрией, кальция в сыворотке крови – комплексометрическим
титрованием, неорганического фосфора – молибденово-кислым способом . В качестве
острофазовых показателей крови использовали определение уровня сиаловых кислот
методом Гесса, серомукоида – турбидиметрическим методом, гликопротеидов – с
использованием молибденово-кислого аммония. О состоянии свертывающей и
противосвертывающей систем крови судили по аутокоагуляционному тесту (АКТ) в
модификации Баркагана З.С. [10], определяя следующие параметры: А –
свертывающую активность на второй минуте (в %), МА – максимальную свертывающую
активность (в%), Т1 – время достижения половинной свертывающей активности (в
минутах), Т2 – время достижения максимальной активности (в минутах), активность
прогрессивных антитромбинов оценивали по индексу инактивации тромбина (ИИТ).
Интенсивность фибринолиза оценивали по уровню растворимых фибрин-мономерных
комплексов.
Уровень Т(CD3) и В-лимфоцитов (CD19) периферической крови определялся методом
спонтанного и комплементарного розеткообразования по Jondal M. [241], в
модификации Петрова Р.В. и соавт. и Когосовой Л.Г. [116, 117]. Субпопуляции
Т-лимфоцитов определяли по чувствительности клеток к теофиллину:
теофиллинрезистентые лимфоциты – Т-хелперы (Т-х) (CD4) – образовывали розетки с
эритроцитами барана после предварительной инкубации клеток с теофиллином;
уровень теофиллин-чувствительных лимфоцитов – Т-супрессоров (Т -с) (CD19) –
определялся как разность между числом спонтанно - розеткообразующих лимфоцитов
и теофиллинрезистентных лимфоцитов. Определение «активных» лимфоцитов (Т-акт) –
проводилось так же, как это описывается для Т- лимфоцитов, по всем операциям,
за исключением сыворотки, которую при определении Т-акт лимфоцитов не добавляют
в инкубационную среду, и длительной холодовой инкубации: после
термостатирования 10 мин. При температуре 37С° и последующего центрифугирования
при 1000 об/мин в течении 5 мин. проводился расчет «активных» лимфоцитов по
принятой методике. Определение субпопуляций лимфоцитов проводили с помощью
моноклональных антител методом иммунофлюоресценции на иммунофлюоресцесцентном
микроскопе, использовались коммерческие наборы «Протеиновый контур»,
Санкт-Петербург. Определяли относительное содержание всей популяции
Т-лимфоцитов (CD3), Т-хелперов (CD4 ), Т-супрессоров (CD8), В-лимфоцитов
(CD19). Функциональная активность нейтр
- Київ+380960830922