РАЗДЕЛ 2
ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Под наблюдением находилось 106 детей в возрасте от 1-го месяца до 3-х лет, среди них было 52 (49%) мальчика и 54 (51%) девочки, больных острыми заболеваниями органов дыхания. Дети обследовались при поступлении в отделение реанимации и интенсивной терапии, на высоте клинических проявлений, и в динамике - на 3-и сутки.
Диагноз устанавливался с использованием общепринятых критериев диагностики, отображающих форму заболевания, стадию воспалительного процесса и функциональные способности легких в соответствии с классификацией неспецифических заболеваний органов дыхания, рекомендованной II съездом Ассоциации фтизиатров и пульмонологов Украины (октябрь, 1998).
Так как, имеет место большой размах колебаний нормативных значений показателей системы гемостаза и фибринолиза (фибриногена, АЧТВ, времени свертывания по Ли-Уайту, РФМК, плазминогена и ОФАК) в венозной крови у детей раннего возраста, и в литературе отсутствуют значения данных показателей в артериальной крови, для определения контрольных значений вышеуказанных показателей в артериальной и в венозной крови, была обследована группа из 10 практически здоровых детей в возрасте от 1-го месяца до 3-х лет. Каждое исследование было согласовано с родителями.
Были проанализированы жалобы больных детей, анамнезы жизни и болезни, аллергологический и семейный анамнезы. Всем детям проведено клинико-лабораторное обследование, которое включало: объективное обследование, клинический анализ крови, клинический анализ мочи, бактериологическое исследование слизи носа и зева, клиническое и бактериологическое исследование мокроты, иммунологическое исследование I уровня, рентгенографическое исследование органов грудной клетки, электрокардиография (аппарат "Mingograf-84" фирмы "Siemens"), эхокардиография (ультразвуковой аппарат "Sigma-21", Kontron, Франция).
Специальной программой предусмотрено оценка состояния регуляторной гемостатической и фибринолитической функции легких:
-определение влияния паренхимы легких на систему гемостаза;
-определение степени нарушения фибринолитической активности легких;
-определение влияния состояния фибринолитической активности легких на течение острых заболеваний органов дыхания и развитие внелегочных осложнений.
Методической основой для проведения специальной программы по оценке состояния регуляторной функции легких на систему гемостаза и фибринолиза явился сравнительный анализ изучаемых параметров в венозной и артериальной крови.
Определялись:
- время свертывания крови по Ли-Уайту, определяемое от момента контакта крови с чужеродной поверхностью до формирования сгустка, как интегральный показатель свертывающей системы крови. Нормативные показатели венозной крови- 6 - 10 мин.[4];
- активность плазминогена оптическим методом, основанным на его способности образовывать комплекс со стрептокиназой, который гидролизует пептидный хромогенный субстрат. Количество высвобождаемого при этом пара-нитроанилина прямо пропорционально активности плазминогена в образце плазмы. Определение активности плазминогена проводилось с помощью набора реагентов РЕАХРОМ-Плазминоген НПО "РЕНАМ" Ассоциации больных гемофилией ГНЦ РАМН. Результаты оценивались на спектрофотометре СФ-46 при длине волны 405 нм. Нормативные показатели - 80-135% активность плазминогена в плазме [72];
- общая фибринолитическая активность плазмы крови (XIIa зависимый фибринолиз), путем выделения эуглобулиновой фракции, содержащей плазминоген, фибриноген, факторы свертывания и не содержащую ингибиторов фибринолиза. Исследование начиналось с внесения в раствор дистиллированной воды и 1% уксусной кислоты 0,5 мл исследуемой плазмы и 0,25 мл 0,5% суспензии каолина, инкубацию полученной смеси в течение 30 мин при температуре 37оС с последующим центрифугированием в течение 6 мин при 1500 об/мин. Затем в пробирку с полученным осадком вносили 0,5 мл прогретого буферного раствора и добавляли 0,5 мл прогретого раствора хлористого кальция. Наблюдали образование сгустка фибрина, который лизируется плазмином за 5-12 мин в норме, при активации реакции XIIa-фактором с помощью набора реагентов НПО "РЕНАМ" Ассоциации больных гемофилией ГНЦ РАМН;
- содержание растворимых высокомолекулярных фибрин-мономерных комплексов (РФМК) па основе оценки времени появления в исследуемой плазме хлопьев фибрина после добавления в нее о-фенантролина (по методу Елыкомова В.А., Момот А.П., 1987), скорость образования которых зависит от концентрации РФМК с помощью набора реагентов НПО "РЕНАМ" Ассоциации больных гемофилией ГНЦ РАМН. Качественная оценка - появление в плазме в течение первых 120 сек. хорошо видимых хлопьев. Количественная оценка проводиться с помощью калибровочного графика. Нормативная концентрация в венозной крови РФМК составляет 3-4 *10-2 г/л.;
- концентрация фибриногена с помощью набора реагентов НПО "РЕНАМ" Ассоциации больных гемофилией ГНЦ РАМН по методу Клаусса, который заключается в том, что к плазме больного, содержащей раствор цитрата натрия, инкубируемой в течение 2 мин. при температуре 37оС добавляют раствор тромбина, затем отмечают время свертывания плазмы с момента добавления тромбина. По калибровочному графику определяют содержание фибриногена в плазме больного. Нормативные показатели венозной крови составляют 2-4 г/л.;
- активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ-тест) путем добавления к цитратной плазме активатора (эллаговая кислота) и фосфолипидов (сои) на оптическом коагулометре с помощью набора реагентов НПО "РЕНАМ" Ассоциации больных гемофилией ГНЦ РАМН. Нормативные показатели венозной крови составляют 30,0 ± 5 сек. (М ±?? 2).;
- этанол-желатиновый тест путем добавления к плазме крови 50% раствора этанола, который вызывает высвобождение ранних продуктов расщепления фибриногена/фибрина, а также фибрин-мономера из его растворимых комплексов в качестве качественной реакции на наличие ПДФ и РФМК. Образование геля и фибриновых нитей считают как положительный результат, а о
- Київ+380960830922