ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы и методы экспериментальных исследований
Экспериментальная часть исследований выполнена на 108 крысах линии Вистар массой 180-200 г. Эти животные близки к человеку по своей структуре АО системы [5].
Для решения задачи по изучению влияния каждого из компонентов хирургической травмы на свободнорадикальные процессы, проведены две серии исследований. В первой серии экспериментов показатели окислительно-антиоксидантного гомеостаза изучались при различных видах обезболивания, во второй серии - при сочетании этих видов обезболивания с моделированием операционной травмы.
Третья и четвертая серии были посвящены фармакологической коррекции окислительно-антиоксидантного гомеостаза: в третьей серии коррекция нарушений проводилась при различных видах обезболивания, а в четвертой серии - при сочетании этих видов обезболивания с моделированием операционной травмы.
Для исследования влияния анестезиологического пособия были выбраны следующие виды анестетиков: эфир (ингаляционный наркоз), тиопентал натрия, кетамин, пропофол (неингаляционный наркоз).
Ингаляционный наркоз позволяет создать любую степень обезболивания, легко управляем. Эфир для наркоза обладает выраженной активностью, достаточной широтой терапевтического воздействия, относительно низкой токсичностью, поэтому широко применяется в эксперименте. При использовании эфира отчетливо выражены стадии наркоза, характерна длительная стадия возбуждения (до 20-30 минут).
Тиопентал натрия обладает снотворным и наркотическим эффектами. При внутривенном введении вызывает наркоз примерно через 1 минуту без стадии возбуждения. Продолжительность действия - 20-30 минут, быстро разрушается в печени, накапливается в больших количествах в жировой ткани. Тиопентал натрия следует вводить очень медленно, так как может наступить резкое угнетение дыхательного и сосудодвигательного центров (апное, коллапс). При внутримышечном введении наркотическое действие тиопентала натрия продолжается до 2,5 ч. Препарат низкотоксичен даже при частых многократных применениях.
Кетамин используют для внутривенного и внутримышечного введения. Кетамин вызывает частичную утрату сознания (состояние типа нейролептаналгезии), имеет анальгетический и легкий снотворный эффект. К достоинствам кетамина следует отнести: большую широту терапевтического действия; быстрое вхождение в наркоз; выраженную анальгезию. При внутривенном введении эффект возникает через 30-60 секунд и длится 5-10 минут, а при внутримышечном - через 2-6 минут и продолжается 15-30 минут.
Пропофол - средство для наркоза ультракороткого действия, с быстрым наступлением эффекта (30 с) и быстрым выходом из наркоза.
Тиопентал натрия, кетамин, пропофол наиболее широко применяемые анестетики в практической медицине для проведения анестезиологического пособия [93, 94].
Неингаляционные анестетики вводились внутрибрюшинно в следующих дозах: тиопентал натрия в дозе 15 мг/кг, кетамин в дозе 7 мг/кг, пропофол в дозе - 10 мг/кг соответственно [93].
Моделью операционной травмы служила лапаротомия и дальнейшее послойное ушивание раны. Лапаротомия проводилась животным после наступления наркотического сна и достижения адекватной степени анестезии.
Исследовалась также группа интактных животных.
В зависимости от вида анестетика в каждой серии исследовались 4 группы животных (табл. 2.1.).
Таблица 2.1
Распределение животных по сериям и группам экспериментов
№ группы п/пПоказателиКоличество крыс1 серия экспериметовIПОЛ, АО активность, ХЛ, гемодинамические показатели при анестезии эфиром6IIПОЛ, АО активность, ХЛ, гемодинамические показатели при введении тиопентала натрия6IIIПОЛ, АО активность, ХЛ, гемодинамические показатели при введении кетамина6IVПОЛ, АО активность, ХЛ, гемодинамические показатели при введении пропофола62 серия экспериметовVПОЛ, АО, ХЛ, гемодинамические показатели при моделировании хирургической травмы на основе проведения анестезии эфиром 6VIПОЛ, АО, ХЛ, гемодинамические показатели при моделировании хирургической травмы и введении тиопентала натрия 6VIIПОЛ, АО, ХЛ, гемодинамические показатели при моделировании хирургической травмы и введении кетамина 6VIIIПОЛ, АО, ХЛ, гемодинамические показатели при моделировании хирургической травмы и введении пропофола 63 серия экспериментовІХПОЛ, АО активность, гемодинамические показатели при анестезии эфиром и АО коррекции6ХПОЛ, АО активность, гемодинамические показатели при введении тиопентала натрия и АО коррекции6ХІПОЛ, АО активность, гемодинамические показатели при введении кетамина и АО коррекции6ХІІПОЛ, АО активность, гемодинамические показатели при введении пропофола и АО коррекции64 серия экспериментовХІІІПОЛ, АО, гемодинамические показатели при моделировании хирургической травмы, анестезии эфиром и АО коррекции6XIVПОЛ и АО, гемодинамические показатели при моделировании хирургической травмы, введении тиопентала натрия и АО коррекции6XVПОЛ и АО, гемодинамические показатели при моделировании хирургической травмы, введении кетамина и АО коррекции6
Продолжение табл. 2.1
№ группы п/пПоказателиКоличество крысXVIПОЛ и АО, гемодинамические показатели при моделировании хирургической травмы, введении пропофола и АО коррекции6XVIIИнтактные крысы12
Количество проведенных биохимических исследований в эксперименте представлено в табл. 2.2.
Содержание животных, способ умерщвления и забора материала. До начала экспериментов животных в течение 1-2 недель выдерживали в виварии на обычном пищевом рационе по 10-20 особей в стандартных металлических клетках. Для исключения влияния сезонных и суточных колебаний на изучаемые показатели основные исследования проводили в осенне-зимний период, в утренние часы. Опыты осуществляли в соответствии со Статусом Украинской ассоциации по биоэтике (1992), требованиями Европейской конвенции по защите позвоночных жив