ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Материалы и методы экспериментальных исследований
Цель экспериментальных исследований состояла в изучении влияния различных
ингибиторов синтеза биологически активных липидов (простагландинов,
лейкотриенов, тромбоксанов): месулида, пеницилламина, диклофенака, колхицина,
имидазола на воспалительную реакцию глаза в условиях моделирования операционной
травмы. Таким образом, мы решили отобрать препараты с наиболее выраженным
противовоспалительным действием в эксперименте для их дальнейшего изучения в
клинике у больных после ЭЭК с имплантацией ИОЛ. Учитывая последние достижения в
разработке и исследовании механизма действия НПВС, для эксперимента нами были
подобраны препараты, которые при помощи различных механизмов блокировали
отдельные участки метаболизма арахидоновой кислоты – колхицин и пеницилламин
блокировали синтез и действие провоспалительных лейкотриенов, имидазол
ингибировал преимущественно тромбоксансинтетазу, диклофенак – ингибировал СОХ-2
и СОХ-1, месулид – селективный ингибитор СОХ-2.
2.1.1. О б ъ е м э к с п е р и м е н т а л ь н ы х и с с л е д о в а н и й. В
эксперименте были использованы 42 кролика(42 глаза) породы Шиншилла весом
2,0-2,5 кг, которые находились на общем рационе вивария института. Все кролики
были в хорошем физическом состоянии и их глаза находились в пределах
физиологической нормы.
2.1.2. М е т о д и к а о п е р а т и в н о г о в м е ш а т е л ь с т в а и м е
т о д и к а п о д а в л е н и я п о с л е о п е р а ц и о н н о й в о с п а - л
и т е л ь н о й р е а к ц и и . Методика моделирования операционной травмы
заключалась в следующем:
а) отсепаровка конъюнктивы от лимба длиной 10 мм в верхней части глазного
яблока;
б) нанесение сквозного разреза склеры по лимбу скребцом длиной 8мм;
в) наложение 3 корнеосклеральных швов(10/0);
г) восстановление передней камеры воздухом;
д) покрытие области раны конъюнктивальным лоскутом с двумя швами на 2-х и 10
часах.
Оперативное вмешательство проводилось под тиопенталовым наркозом. Препарат
разводился на физиологическом растворе (1:20) и вводился 1 мл/кг веса
внутримышечно. Животным всех групп оперативное воздействие проводилось по
единой методике.
В зависимости от медикаментозной терапии животные были поделены на 7 групп. В
каждой группе было по 6 кроликов.
Всего в работе было использовано 5 препаратов: месулид, пеницилламин,
диклофенак, колхицин, имидазол.
Таким образом, были использованы препараты, которые при помощи различных
механизмов блокировали отдельные участки метаболизма арахидоновой кислоты –
колхицин и пеницилламин блокировали синтез лейкотриенов, имидазол ингибировал
преимущественно тромбоксансинтетазу, диклофенак – ингибировал СОХ-2 и СОХ-1,
месулид – селективный ингибитор СОХ-2.
В глаза кроликов 1-ой группы (контрольной) закапывали только 30% раствор
альбуцида 5 раз в день в течение всего периода наблюдений(табл.2.1).
Во второй группе животные получали перорально по 1 мг колхицина в день (внутрь
зондом) за 4 часа до операции и такую же дозу ежедневно после операции.
В третьей группе животным вводили с помощью зонда перорально пеницилламин по
250 мг за 4 часа до операции и затем повторяли введение препарата 1 раз в день
в течение послеоперационного наблюдения.
В четвертой группе кролики получали имидазол в виде подкожных инъекций 1 раз в
день из расчета 250 мг на 1 кг веса за 4 часа до операции и затем 1 раз в
день.
В пятой группе кролики получали перорально по 25 мг месулида в день с помощью
зонда за 4 часа до операции, а затем один раз в день в течении всего периода
наблюдения.
В шестой группе применяли перорально по 25 мг диклофенака при помощи зонда за 4
часа до операции, затем ежедневно после операции в такой же дозировке.
Кролики седьмой группы получали внутрь одновременно два препарата: пеницилламин
по 250 мг в день и месулид по 25 мг в день (через зонд) за 4 часа до операции и
затем один раз в день.
Всем кроликам до операции производилась биомикроскопия глаз с помощью щелевой
лампы “ОПТОН” .
Таблица 2.1.
Cхема применения противовоспалительных препаратов до и после операции в
различных группах кроликов
Группы кроликов
Медикаментозная терапия за 4 часа до операции
Медикаментозная терапия в последующие 10 дней
1.Контрольная группа
-------------------------
30% альбуцид в виде капель 5 раз в день
2.Группа с колхицином
колхицин 1мг
перорально
колхицин 1мг перорально 1 раз в день
3.Группа с пеницилламином
пенициламин 250мг
перорально
пеницилламина 250 мг
перорально 1 раз в день
Таблица 2.1.(продолжение)
Группы кроликов
Медикаментозная терапия за 4 часа до операции
Медикаментозная терапия в последующие 10 дней
4.Группа с имидазолом
имидазол 250 мг/кг
виде подкожных инъекции
имидазол 250 мг/кг виде подкожных инъекции 1 раз в день
5.Группа с месулидом
месулид 25мг
перорально
месулид 25 мг
перорально 1 раз в день
6.Группа с диклофенаком
диклофенак 25 мг
перорально
диклофенак 25мг
перорально 1 раз в день
7.Группа с месулидом+
пенициламином
пеницилламин 250мг + месулид 25мг перорально
пеницилламин 250 мг
+ месулид 25мг перорально 1 раз в день
2.1.3. М е т о д ы к л и н и ч е с к о г о н а б л ю д е н и я з а с о с т о я
н и е м г л а з э к с п е р и м е н т а л ь н ы х ж и в о т н ы х. Каждый день
проводилась биомикроскопия глаз экспериментальных животных при помощи щелевой
лампы “Оптон” и отмечалась степень воспалительной реакции (в баллах). Кролики
находились под наблюдением до 11 дня после операции.
Оценка степени воспалительной реакции проводилась в баллах по следующим
клиническим признакам:
А) по степени перикорнеальной инъекции сосудов:
1 балл – физиологичес
- Київ+380960830922