РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Опыты выполнены на 129 взрослых (2-3 года) беспородных собаках обоего пола весом 12,3-17,6 кг. Содержание, кормление и постановка экспериментов выполнялись в соответствии с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных" (1984).
За день до операции собак не кормили, производили взвешивание. Операции выполнялись под наркозом в стерильных условиях экспериментальной операционной. Через 15-20 мин после премедикации внутриплеврально вводили 10% раствор тиопентала натрия из расчета 40-50 мг/кг массы животного [70]. Наркотический сон наступал через 10-15 мин после инъекции и продолжался 3-4 часа.
У животных контрольной (I-й) серии опытов выполняли верхнесрединную лапаротомию и выводили в рану начальный отдел тощей кишки. Отступя 10-15 см от связки Трейтца, в противобрыжеечном крае в мышечный слой стенки кишки на расстоянии 1 см друг от друга имплантировали два электрода из рафинированного серебра для регистрации на протяжении 30 суток электрофизиологических показателей неизмененной тонкой кишки: биопотенциалов (ЭЭнГ) и электропроводимости (импедансометрия) (рис. 2.1). Концы электродов через подкожный туннель на боковой стенке груди выводили на кожу спины животного (рис. 2.2). Рану брюшной полости послойно ушивали наглухо.
Не останавливаясь подробно на послеоперационном ведении животных, основанном на принципах, изложенных в работе С.А.Шалимова и др. [70], отметим, что всем без исключения собакам как контрольной, так и последующих серий опытов проводили курс профилактической антибактериальной терапии (внутримышечно 2 раза в сутки вводили гентамицина сульфат из расчета 3,0 мг/кг массы животного).
Рис. 2.1. Общий вид тонкой кишки с вживленными электродами в месте предполагаемого орального конца трансплантата.
Рис. 2.2. Выведенные через подкожный туннель на спину собаки концы электродов для электроэнтерографии и регистрации импеданса тонкокишечного трансплантата.
Через 1, 14 и 30 суток после операции (по три собаки в срок) после определения электрических характеристик тонкой кишки, в результате релапаротомии производили резекцию ее участка с вживленными электродами для дальнейшего комплексного морфологического исследования. Целостность желудочно-кишечного тракта восстанавливали путем наложения энтеро-энтероанастомоза бок в бок. Брюшную полость ушивали послойно наглухо.
Серии опытов и количество экспериментальных животных представлены в таблице 2.1.
Таблица 2.1
Распределение животных по сериям опытов
Серия
опытов
ЭКСПЕРИМЕНТПроопери-ровано
собакВыведены из опытаПогибли
в ходе
опытаIКонтроль99-IIВыкраивание тонкокишечного
трансплантата с пересечением
одной пары брыжеечных сосудов
32
32
-IIIВыкраивание тонкокишечного трансплантата с пересечением
двух пар брыжеечных сосудов
32
32
-IVВыкраивание тонкокишечного
трансплантата с пересечением
трех пар брыжеечных сосудов
45
29
16VВыкраивание тонкокишечного
трансплантата с пересечением
четырех пар брыжеечных сосудов
11
5Всего:12910821
Во II-й серии опытов перед выкраиванием тонкокишечного трансплантата с выключением 1 пары брыжеечных сосудов, у места предполагаемого его орального конца, также имплантировали два электрода для регистрации электрофизиологических показателей.
Техника вживления электродов в данной и последующих сериях опытов не отличалась от таковой в контрольной группе.
Произведя регистрацию исходных данных ЭЭнГ и импеданса неизмененной тонкой кишки, приступали к следующему этапу операции.
Осуществив анестезию корня брыжейки 0,25% раствором новокаина (15-20 мл), приступали к мобилизации тонкокишечного трансплантата. Причем трансплантат формировали таким образом, чтобы вживленные электроды оставались в его оральном конце. Первую брыжеечную артерию пропускали, так как она обычно имеет рассыпной тип ветвления и незначительную длину. Перевязка этого сосуда почти не дает выигрыша в длине тонкокишечного трансплантата и создает неудобства в связи с образованием на его конце изгиба в форме крючка [106]. Поэтому пересечение сосудов начинали со второй или третьей, а иногда и с четвертой пары брыжеечных артерий и вен, которые, по мнению большинства исследователей, являются наиболее подходящими для выкраивания трансплантата, так как имеют большую длину и калибр, а также более выгодный тип ветвления [66].
После перевязки и перерезки намеченных брыжеечных артерии и вены на уровне пересечения тонкой кишки выключали и их краевые аркады. На кишку накладывали эластичные жомы, между которыми ее перерезали. Культи погружали в кисетные швы. Пересекая бессосудистые поля брыжейки, получали тонкокишечный трансплантат с вживленными в его оральный конец электродами. Для восстановления целостности желудочно-кишечного тракта между культей кишки и отводящим отделом трансплантата накладывали энтероэнтероанастомоз бок в бок или конец в бок (рис. 2.3).
Межкишечный анастомоз формировали двухрядным швом (внутренний непрерывный - кетгутом, наружный узловой - капроном). Дупликатуры брыжейки ушивали узловыми швами. Выкроенный трансплантат проводили по методу С.И.Бабичева, Б.С.Брыскина [61] через отверстие в брыжейке поперечной ободочной кишки позади желудка в верхний этаж брюшной полости для фиксации его к диафрагме. Концы электродов через подкожный туннель выводили на кожу спины собаки. Брюшную полость ушивали послойно наглухо.
Рис. 2.3. Общий вид тонкокишечного трансплантата, выкроенного с пересечением трех пар брыжеечных сосудов.
Через 1, 3, 5, 7, 10, 14, 21 и 30 суток после операции производили регистрацию показателей импеданса и ЭЭнГ с последующей релапаротомией и иссечением орального конца тонкокишечного трансплантата для морфологического исследования.
Все экспериментальные животные данной серии опытов были выведены из опыта в указанные сроки. В течение 7 дней после операции собакам вводили антибиотики.
В III-й серии опытов выкраивали тонкок
- Київ+380960830922