С ОДЕРЖАНИЕ
1. Введение...........................................................5
Актуальность темы..................................................5
2. Аналитический обзор литературы....................................10
2.1. Функциональная значимость микроорганизмов воздушной среды закрытых помещений и их влияние на иммунобиологический статус животных..........................................................10
2.2. Гиперчувствительность как одна из форм иммунного реагирования. Условия формирования гиперчувствителыюсти по замедленному и немедленному типу.................................................23
2.3. Оценка функциональной активности клеток, позволяющая выявить иммунологическую несостоятельность организма....................31
3. Собственные исследования..........................................43
3.1. Материалы и методы исследований............................... 43
3.2. Результаты исследований.........................................56
3.2.1. Бактериальная обсемененность воздушной среды закрытых помещений.............................................................56
3.2.2. Чувствительность животных к антигенам микроорганизмов различной таксономической принадлежности.......................................64
3.2.3. Зависимость между гиперчувствительностыо и естественной резистентностью организма...........................................68
3.2.4. Совершенствование методики определения гиперчувствителыюсти организма.........................................................77
4. Обсуждение результатов............................................80
4.1. Особенности реагирования животных на микробные антигены воздушной среды помещения..................................................80
5. Выводы..........................................................87
6. Практические предложения........................................90
7. Список литературы...............................................91
8. Приложения.....................................................118
3
ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
CD-молекулы - (от англ. Cluster of Differentiation) кластеры
дифферснцировки
Fc-рецептор - рецептор к Fc-фрагменту молекулы иммуноглобулина
Fc-фрагмент - антигенсвязывающий фрагмент иммуноглобулиновой
молекулы
Ig - иммуноглобулины (классы: A, G, М, D, Е и подклассы:
1,2, 3,4)
1г-гены - (от англ. Immune response genes) гены иммунного ответа
PCR - полимеразноцепная реакция
БГКП — бактерии группы кишечной палочки
В-лимфоциты — популяция бурсозависимых лимфоцитов, анатомический
субстрат гуморального иммунитета г — грамм
г/л — грамм на литр
ГЧЗТ - гиперчувствительность замедленного типа
ГЧНТ - гиперчувствитсльность нехмедленного типа
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ЕАС - розетки В-лимфоцитов с эритроцитами мыши,
конъюгированные с комплементом ЕК-, NK-клетки - естественные киллеры
Е-РОК - розетки Т-лимфоцитов с эритроцитами барана
ИЛ-1 - ИЛ-18 - интерлейкины
ИНФ - интерфероны (а, р, у и др.)
ИФА - иммуноферментный анализ
кг - килограмм
КОЕ - колониеобразующис единицы
Кон А - конканавалин А
л - литр
л/мин - литров в минуту
ЛПС - липополисахарид грамотрицательных бактерий
м. т. - микробных тел
мг - миллиграмм
МЕ/мл - международных единиц в миллилитре
МКА - моноклональные антитела
мкм - МИКрОхМетрОВ
МЛ — митоген лаконоса
мл ” - миллилитр
млрд. - миллиард
МПА - мясопептонный агар
МПБ — мясопептонный бульон
НСТ-тест — тест восстановления нитросинего тетразолия
об/мин - оборотов в минуту
ПБДС - пластина биохимическая, дифференцирующая
распространяется на расстояние 2-3 км (Дементьев Е. П., Казадаев В. А.,
2004).
По данным А. Э. Высоцкого (2006), общая бактериальная обсемененность воздуха в секции для супоросных свиноматок до проведения дезинфекции и мойки составляла 11250,0—118300,0 КОЕ/м3. После мойки и аэрозольной дезинфекции общая бактериальная обсемененность воздуха снизилась до 1290,0-1890,0 КОЕ/м3. Изменялся и качественный состав микрофлоры, так концентрация бактерий группы кишечной палочки и энтеробактерий колебалась в пределах 645,0—1250,0 КОЕ/м3, стафилококков 7240,0-7690,0 КОЕ/м3, а после проведения дезинфекции количество БГКП и энтеробактерий уменьшилось в 10-20 раз, стафилококков и бактерий рода Bacillus - в 4 раза. В течение всего подсосного периода в секторе, где регулярно проводилась профилактическая аэрозольная дезинфекция, отмечалось отсутствие падежа поросят, в то время, когда в секции, где дезинфекция не проводилась за период подсоса пало 58 голов.
Сравнительный анализ, проведенный С. W. Purdy ct al. (2004), типа и количества микроорганизмов и концентрации эндотоксина в воздухе на откормочных площадках для крупного рогатого скота в зимний и летний периоды показал, что значительно больше микроорганизмов культивируется из проб воздуха, взятых из верхнего воздушного потока, а также взятых летом, однако средняя концентрация эндотоксина была значительно выше зимой (8,37 мг/м3), чем летом (2,63 мг/м3). Среднее количество мезофильных бактерий (1441,Oil95,0 КОЕ/м3) было значительно выше среднего числа анаэробных бактерий (751,0il33,0 КОЕ/м3) и термофильных бактерий (54,Oil0,0 КОЕ/м3). Пробы воздуха содержали больше мезофильных грибов (78,0i7,0 КОЕ/м3), чем термофильных (2,0i0,2 КОЕ/м3). С помощью автоматизированной системы было идентифицировано 18 родов бактерий. Результаты показали, что грамотрицательные микроорганизмы представляли меньший риск аэрозольной передачи их телятам и обслуживающему персоналу, а грамположительные микроорганизмы, такие как Bacillus,
Corynebacterium и Staphylococcus аэрозольно распространялись как на откормочных площадках, так и вокруг них.
Исследования V. Ribikauskasa и G. Vaicionisa (2003) зафязнений воздушной среды открытых и закрытых коровников аммиаком и микроорганизмами показали, что в разных технологических зонах загрязнение значительно различается. Независимо от типа коровников (открытый или закрытый) наиболее интенсивно аммиак выделялся в зонах
л
удаления навоза и стоил (22,5-52,6 мг/м /ч), а меньше всего - в зонах кормораздачи. В воздухе закрытых коровников установлена наибольшая концентрация аммиака и общего количества микроорганизмов (3,5-4,6 мг/м2/ч и 53800,0-141800,0 КОЕ/м3) по сравнению с открытыми коровниками (0,6-2,8 мг/м2/ч и 19100,0 -61700,0 КОЕ/м3).
Мониторинг условно-патогенной микрофлоры в птицехозяйствах разного технологического направления, проведенный Т. В. Вершняк, Д. П. Кузнецовым и другими (2004), установил, что в процессе вывода цыплят шло интенсивное накопление микрофлоры в воздухе выводного инкубатора. Так, общее количество микроорганизмов при выводе 30-40% цыплят в 2 раза больше, чем в начале вывода; при выводе 60% - в 10 раз, а при выводе 80% -в 12 раз. Такая же закономерность отмечалась и в росте отдельных видов микроорганизмов. Так, количество эшерихий к концу вывода увеличилось в 8 раз, а стафилококков - в 4 раза. При изучении спектра микрофлоры птичников, где содержались цыплята, установлено, что микроорганизмы, выделенные из воздуха выводных инкубаторов, трупов цыплят, объектов внешней среды в большинстве случаев идентичны и играли существенную роль в патологии птицы разного возраста.
Постоянный контакт дыхательных путей организма с внешней средой обусловливает присутствие на слизистых оболочках патогенной и условно-патогенной флоры (Беклемишев Н. Д., 1984). Многие виды сапрофитных микробов, поселяясь в верхних и нижних дыхательных путях и не вызывая резкой реакции со стороны средств гуморальной и клеточной защиты,
- Київ+380960830922