2
ОГЛАВЛЕНИЕ с.
Введение.......................................................4
1 Обзор литературы...............................................9
1.1 Характеристика возбудителя лептоспироза........................9
12 Видовые особенности проявления лептоспироза у животных........15
1.3 Особенности проявления лептоспироза у кошек...................28
1.4 Заключение по обзору литературы...............................32
Собственные исследования......................................35
2 Материалы и методы............................................35
3 Результаты исследований.......................................42
3.1 Эпизоотологическое обследование кошек на лептоспироз в
г. Барнауле...................................................42
3.2 Возрастная динамика некоторых морфобиохимических показателей
крови, сыворотки и мочи у здоровых и инфицированных возбудителем лептоспироза кошек........................................48
3.2.1 . Морфобиохимические показатели крови, сыворотки и мочи у здоро-
вых животных..................................................49
3.2.2 Морфобиохимические показатели крови, сыворотки и мочи у животных, инфицированных возбудителем лептоспироза 52
3.3 Макромикроморфологические исследования почек кошек............54
3.3.1 Возрастные особенности макромикроморфологии почек здоровых
. животных.....................................................55
3.3.2 Макромикроморфологические изменения почек кошек, инфицированных возбудителем лептоспироза....................................63
3.4 Экспериментальное заражение кошек возбудителем лептоспироза... 67
3.5 Совершенствование лабораторной диагностики лептоспироза у кошек 72
3.5.1 Реакция агглютинации..........................................72
3.5.2 Полимеразная цепная реакция...................................74
3.6 Изучение устойчивости лептоспир в моче кошек..................78
3.7 Профилактика лептоспироза у кошек.............................80
Обсуждение результатов исследования...........................82
Выводы........................................................90
Практические предложения......................................93
Библиография..................................................94
Приложения...................................................106
3
Список сокращений, приводимых в тексте ИФА - иммуноферментный анализ
Лепто БАСА — Лептоспира Байрам-Али Слайд-антиген Института эпидемиологии и микробиологии АМН им. Н.Ф. Гамалеи ПЦР - полимеразная цепная реакция РА - реакция агглютинации РАЛ - реакция агглютинации и лизиса РМА - реакция микроагглютинации РНГА - реакция непрямой гемагглютинации РСК - реакция связывания комплемента СОЭ — скорость оседания эритроцитов
10
дующим образом. Покров окружает осевую нить и цитоплазматический цилиндр. Он имеет трехслойное или более сложное строение, хорошо выявляемое лишь на ультратонких срезах, образует цистоиодобные вздутия, полые и концевые вздутия к концевым придаткам. Осевая нить имеет двунитчатое строение и прикрепляется к цитоплазматическому цилиндру лишь одним концом с помощью гранулы - блсфаропласта внутри терминального органа. В каждой клетке есть две независимые нити, прикрепленные на противоположных концах клетки и направленные навстречу друг другу, а средняя часть клетки не содержит осевой нити. На поперечных срезах осевая нить представлена двумя группами микрофибрилл, по 6 - 7 в каждой группе. Обе группы по размерам соответствуют двунитчатому аксистилю. Цитоплазматический цилиндр содержит ядерный материал, внутрицитоплазматическис мембранные структуры, включения, проницаемые для электронов, неизвестной природы, а также электронно-плотные включения двух типов: состоящие из ДНК и полифосфатов или имеющие полисахаридную природу (В.В. Ананьин с соавт., 1961).
Лептоспиры — строгие аэробы. Оптимальный pH среды для их культивирования - 7,0 - 7,4, температура - 38 - 40 °С, т.е. температура тела животных и человека (Берджи, 1983). Однако в лабораторных условиях их культивируют при температуре 28 - 30 °С, ниже 13 °С патогенные лептоспиры обычно не растут.
Лептоспиры размножаются путем поперечного деления клетки. Продолжительность одной генерации у лептоспир значительно больше, чем у бактерий многих видов и составляет 6-16 часов (B.C. Киктенко, 1955, Faine S., 1957).
Динамика размножения лептоспир в питательных средах подчиняется закономерностям, общим для большинства видов бактерий. Культура развивается в виде определенных последовательных фаз, характер которых зависит от состояния клеток, питательной среды и других внешних факторов. Требования лептоспир к составу питательной среды относительно просты, но весьма разнообразны.
11
Необходимыми органическими соединениями для лептоспир являются длинные цепи жирных кислот (15 атомов углерода и более) и витамины: тиамин (Bi), цианкобаламин (В)2).
Inada R., Ido Y., Hoki R. et al. (1916) впервые выделили лептоспиры на среде Noguchi (питательный агар - 1 часть, раствор Рингера - 3, сыворотка кролика - 1 и цитратная плазма кролика - 0,5 части). Uhlenhuth Р., Fromme W. (1916) вырастили лептоспиры, независимо от японских исследователей, на инактивированной кроличьей сыворотке, разбавленной в 10 и 20 раз холодной водой. Кроличья сыворотка, добавляемая в пропорциях от 5 до 30 %, стала одним из основных компонентов, входящих в состав питательных сред для культивирования лептоспир (Vervoort H., 1923; В.И. Терских, 1933; М.В. Земсков, Л.Л. Авроров, 1941 и др.).
Полужидкие сывороточные среды с агаром предложили Fletcher W. (1928), Wiesmann E. (1952), B.C. Киктенко (1954). Добавление агара задерживает высыхание среды и способствует сохранению культуры более длительные сроки без пересевов.
Fukushima В. (1927) первый получил колонии лептоспир на плотной среде, состоящей из плазмы крови лошади, различных солей и агара. В Советском Союзе плотные питательные среды для культивирования лептоспир предложили З.Х. Каримова (1971), С.К. Канарейкина (1973), Г.Л. Соболева (1979) и др.
В последующие годы предложен ряд полусинтетических бессывороточ-ных сред с бычьим и овечьим альбумином (Ellis W.A. et al., 1986). Синтетическую безбелковую среду предложили Staneck J., Henneberry J., Сох R. (1973).
В настоящее время широко применяются жидкие среды Ферворт-Вольфа, Терских, Кортгофа и др.
При росте в жидкой питательной среде лептоспиры не образуют поверхностной пленки, осадка, пристеночного кольца. На сывороточных средах при просмотре в проходящем свете в культурах лептоспир видно слабое помутнение, при встряхивании переливающееся в виде муаровых волн; на твин-
- Київ+380960830922