РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ, МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ЛЕЧЕНИЯ
2.1 Экспериментальная часть
С целью выявления возможного поражения КТ при БА и влияния на КТ отдельных
элементов базисной терапии, применяемых при лечении БА, нами проведено
экспериментальное исследование.
Исследования проведены на 36 половозрелых морских свинках, которые являются
адекватным видом млекопитающих для экспериментального моделирования БА [ 42,
140]. Возраст животных составлял 5-6 месяцев в начале проведения эксперимента,
а вес – 500-700 г. Животные составили 5 групп: I – интактные здоровые животные;
II – группа контрольных животных, у которых моделировалась БА, но лечение не
проводилось; III – группа животных, которым моделировалась БА и проводилось
лечение ИГКС - фликсотидом (GlaxoSmithKline Pharmaceuticals S.A., Польша), и
препаратами кальция, IV - группа животных, которым моделировалась БА и
проводилось лечение препаратом кромитал (Мидас Керр Фармасьютикалс ПВТ.ЛТД,
Индия). Активным компонентом препарата кромитал является кромогликат натрия, V
- группа животных, которым моделировалась БА и проводилось лечение фликсотидом
и кромиталом.
Моделирование бронхиальной астмы осуществлялось согласно метода J. J. de Bie,
2000 путем внутрибрюшинного введения овальбумина из расчета 10 мг на 100 г
веса. Овальбумин растворялся в 0,5 мл стерильной апирогенной воде для инъекций.
Затем в течение 3 месяцев морским свинкам моделировали приступы БА под
воздействием овальбумина, который вводили в дозе 4 мг на 1 мл дистиллированной
воды в течение 10 минут, через день. Распыление антигена проводили при помощи
ультразвукового ингалятора «Муссон-2». Через 1 месяц, на фоне моделирования
приступов БА (3 раза в неделю по 10-12 минут), была проведена терапия. Лечение
проводилось 2 раза в день по 30-45 секунд. Препараты распылялись в самодельную
камеру, имитирующую бебихалер. Дозировка вдыхаемого препарата расчитывалась с
учетом массы животных, частоты дыхания и объема камеры, составляющей 500 смі.
Из эксперимента животных выводили под эфирным наркозом путем декапитации. Для
изучения отбирали бедренные кости, которые подвергались фиксации,
деминерализации, заливке в парафиновые блоки. Забор материала осуществляли по
истечении 30, 60, 90 суток опыта.
Гистологически изучали эпифизарный хрящ проксимального отдела большеберцовой
кости. При этом для гистологического исследования брали фрагменты кости из
области эпифизов, фиксируя в 10 % растворе формалина. Декальцинацию проводили
10 % раствором муравьиной кислоты и заливали в парафиновые блоки. Готовили
гистологические срезы толщиной в 5-10-15 мкм, которые окрашивали
гематоксилин-эозином. Морфометрические исследования проксимального эпифиза
длинных трубчатых костей проводили по методике Г.А. Автандилова с помощью
комплекса для морфометрических исследований с цифровой обработкой полученных
данных.
Морфометрические исследования кости проведены с использованием оптического
анализатора изображения на микроскопе “OLYMPUS”, проводили с использованием
программного обеспечения «Видеотест-Морфология» (Свидетельство об официальной
регистрации программы для ЭВМ № 990537 от 27.07.1997 г.). Для характеристики
эпифизарного хряща использовали классификацию В.Г. Ковешникова, являющуюся
наиболее адаптированной к описанию изменений эпифизарного хряща под влиянием
экзогенных факторов. Морфометрию проксимальных эпифизов длинных трубчатых
костей проводили по такой программе: 1) ширина эпифизарного хряща; 2) ширина
зоны индифферентного хряща; 3) ширина зоны пролиферации; 4) ширина зоны
дефинитивного хряща; 5) процентное соотношение клеточных элементов и
межклеточного вещества эпифизарного хряща; 6) долю первичной спонгиозы.
В поперечных срезах диафиза бедренной кости измеряли толщину кости, площадь
профильного поля костного матрикса между периостом и эндостом, суммарную
площадь профильного поля каналов остеонов и других полостей внутри кости. На
основании полученных данных вычисляли отношение площади матрикса к площади
каналов остеонов. Данное отношение характеризовалось как индекс интенсивности
трофики и оссификации кости. Морфологические исследования выполнены на
стандартному увеличении 20ґ10ґ1,5. Количественные данные указаны в пикселях и
обработаны методом вариационной статистики. Сравнение количественных данных
проводили с помощью критерия Т. Стьюдента.
Опыты проводили в соответствии с «Правилами проведения работ с
экспериментальными животными» и соблюдения биоэтической экспертизы.
2.2 Клиническая характеристика обследованных детей с бронхиальной астмой
Проведено обследование 230 детей, болеющих БА, в возрасте от 7 до 16 лет,
которые находились на санаторно-курортном лечении в детских санаториях г.
Евпатория: МДСОЦ «Дружба», «Смена», «Лучезарный», прибывшие на
санаторно-курортный этап реабилитации из различных регионов Украины.
Продолжительность нахождения детей в санатории составляла 24 дня.
В период с января 2006 г. по январь 2007 г. в поликлинике г. Евпатории 40 детей
с БА наблюдались амбулаторно. Параллельно были обследованы 30 здоровых детей,
прибывших в санатории на оздоровление. Все обследованные дети относились к I
группе здоровья, не имели хронических заболеваний и в течение 2-х предыдущих
месяцев не болели острыми респираторными заболеваниями (в течение года ОРЗ в
данной группе регистрировались не чаще 1-2 раз). При анализе анамнестических
данных нами было установлено, что у матерей 6 детей (28,6 %) регистрировалось
неблагоприятное течение беременности (гестозы I и II половины беременности).
Среди больных всех возрастных групп преобладали мальчики, составившие 151 чел.
-
- Київ+380960830922