2
СОДЕРЖАНИЕ
стр.
ВВЕДЕНИЕ 5
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 16
ГЛАВА I. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭШЕРИХИЙ 16
1.1. Классификация и номенклатура семейства ЕгИегоЬасгепасеае 16
1.2. Морфологические, культуральные, ферментативные свойства 18 эшерихий
1.3. Антигенные свойства эшерихий - возбудителей колибакгериоза 21 животных и человека
1.3.1. Липополисахаридные О-антигены 21
1.3.2. Капсульные полисахаридные К-антигены 23
1.3.3. Жгутиковые Н-ангигены 24
ГЛАВА 2. ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ ЭШЕРИХИЙ И ИХ РОЛЬ
В ПАТОГЕ11ЕЗЕ КОЛИБАКТЕРИОЗА ЖИВОТНЫХ 26
2.1. Эндотоксины .27
2.2. Экзотоксины (энтеротоксины) ' 28
2.2.1. Термолабильный энтеротоксин 31
2.2.2. Термостабильный энтеротоксин 33
2.2.3. Веротоксины - 35
2.3. Антигены адгезии 36
2.3.1. Фимбрии I типа 37
2.3.2. Специфические антигены адгезии 38
2.3.2.1. Антиген К88 (Р4) 41
2.3.2.2. Антиген К99 (Р5) 43
2.3.2.3. Антиген 987Р (Р6) 46
2.3.2.4. Антиген Р41 47
2.3.2.5. Малоизученные антигены адгезии 48
2.4. Гемолизины 51
2.5. Колицины 52
3
ГЛАВА 3. ПАТОГЕНЕЗ И ФОРМЫ ПРОЯВЛЕНИЯ ЭШЕРИХИОЗА У
ЖИВОТНЫХ 54
3 Л. Энтеротоксическая форма эшерихиоза 54
3.2. Энтеротоксемическая форма эшерихиоза 59
3.3. Энтероинвазивная форма эшерихиоза 60
3.4. Септическая форма эшерихиоза 61
3.5. Энтеропатогенная форма эшерихиоза 63
ГЛАВА 4. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА И ТЕРАПИЯ
ЭШЕРИХИОЗА ЖИВОТНЫХ 65
4.1. Вакцины 72
4.2. Лечебные сыворотки 96
4.3. Заключение 99
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ И ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ 102 ГЛАВА 5. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 102
5.1. Материалы 102
5.2. Методы 110
5.3. Статистическая обработка результатов 118
ГЛАВА 6. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ШТАММОВ ЭШЕРИХИЙ
И ИХ СЕЛЕКЦИЯ 120
6.1. Морфологические, культуральные и ферментативные свойства 120 штаммов
6.2. Антигенная структура и способность продуцировать гемолизины 128
6.3. Вирулентные, токсигенные свойства и спектр чувствительности к 136 антибиотикам
6.4. Верогоксины эшерихий и получение антисывороток к ним 146
6.5. Подбор оптимальных питательных сред для продукции эшерихиями 151 адгезивных антигенов и энтеротоксинов
6.6. Селекция производственных штаммов эшерихий - продуцентов 156 адгезивных антигенов и энтеротоксинов
ГЛАВА 7. ТЕХНОЛОГИЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ, МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ И
ПРИМЕНЕНИЯ ВАКЦИН, ОБОГАЩЕННЫХ АДГЕЗИВНЫМИ [68
АНТИГЕНАМИ К88 И К99 (КОЛИ-ВАК К88 И КОЛИ-ВАК К99)
7.1. Выращивание бакмассы и получение адгезивных антигенов 169
носителями генов синтеза антигенов адгезии. Напротив, Ті1-токсин не продуцируется отдельно (252).
2.2.1. Термолабильный энтеротоксин.
Большой интерес вызывает термолабильный энтеротоксин и механизм его действия (42, 70, 384). Очищенный ТЛ-энтеротоксин представляет собой белково-липо-полисахаридный комплекс. Молекулярная масса токсина варьирует в зависимости от метода ее определения от 102 до 200 кДа, изоэлектри-чсская точка равна 8,0. Он иммуногенен и имеет сходные иммунологические реакции с холерогеном (42, 167).
ТЛ-энтеротоксин разрушается после 30-минутного прогревания при 60°С, не диализируется через целлофановые мембраны, инактивируется в среде с pH 4,0-5,0 и под действием проназы.
ТЛ-токсии состоит из одной тяжелой А-субъсдиницы и 4-6 легких В-субъединиц. Первая отвечает за токсическую активность энтеротоксина,
ЬиГ7 -/ А
вторые - за его приспособление к рецепторам энтероцитов.
•ч
А- и В-субъединицы в отдельности не обладают токсической активностью. Для проявления энтеротоксичности ТЛ-токсина необходима ассоциация его субъединиц в единую молекулу. Согласно данным некоторых авторов (70, 323), А- и В-субъединицы синтезируются в цитоплазме клетки, проходят (транслоцируются) через цитоплазматическую мембрану в иериплазматическое пространство, созревают, объединяются в целую молекулу и затем под влиянием кишечного сока выходят наружу мембраны бактериальной клетки.
В эпителиальных клетках кишечника новорожденных животных А-субъединица ТЛ-токсина эшерихий нарушает функцию органоидов, ответственных за синтез протеина, модифицирует ферментативную систему, локализованную на плазматической мембране, стимулирует
32
аденилциклазную активность. По влиянию на эпителиальные клетки кишечника А-субъединица сходна с аналогичной субъединицей бактерий рода Corynebaclerium, Shigella и Pseudomonas, а по действию на клеточную плазматическую мембрану - с токсином V.cholerae и ТС-токсином E.coli (118, 295, 357, 380).
В-субъединицы по сравнению с А-субъединицей обладают более выраженными антигенными свойствами. Поэтому при конструировании и селекции вакцинных (рекомбинантных) штаммов эшерихий предпочтение отдают тем вариантам, которые способны синтезировать TJI-энтеротоксин с большим содержанием в нем В-субъсдиниц, чем А-субъединиц (70, 295).
С помощью ієн ной инженерии можно конструировать клетки E.coli с повышенной способностью к синтезу TJI-энтеротоксина и с большим содержанием в нем белкового компонента В и малым - компонента А. Такие бактериальные клетки пригодны для производства вакцин против эшерихиоза.
Рецепторами-мишенями для TJl-энтеро'токсина эшерихий на энтероцитах чувствительных к нему животных служат ганглиозиды, гликопротеины и галактосодержащие вещества типа агарозы (384).
ТЛ-токсин, связавшись с ганглиозидом, взаимодействует с аденилатциклазным комплексом, локализованным на внутренней стороне плазматической мембраны энтероцита. В результате такого взаимодействия происходит превращение аденозин-3, 5 -трифосфата (АТФ) в циклический аденозин-3,5-монофосфат (цАМФ), гиперсекреция клетками крипт кишечника изотонической жидкости с высоким содержанием в ней ионов натрия, хлора и бикарбоната и угнетение реабсорбции ионов натрия и хлора вследствие усиленного образования цАМФ (70, 323, 330, 347).
- Киев+380960830922