2
ОГЛАВЛЕНИЕ
стр.
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ................................ 6
ВВЕДЕНИЕ...................................................... 7
Глава 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О СТРОЕНИИ,
МЕТОДАХ ВЫДЕЛЕНИЯ, ОЧИСТКИ, АНАЛИЗА И СВОЙСТВАХ
ГУМИНОВЫХ КИСЛОТ И ГУ МИНОПОДОБНЫХ ВЕЩЕСТВ.................... 12
1.1. Образование и строение гуминовых веществ................. 12
1.2. Прогуминовые и гуминоподобные вещества.................. 17
1.3. Методы изолирования, очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ.......................... 20
1.4. Физико-химические методы, используемые для анализа гуминовых кислот и гуминоподобных веществ.......................... 30
1.5. Медико-биологические свойства гуминовых кислот и гуминоподобных веществ.............................................. 39
Заключение по главе 1......................................... 42
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ................................... 43
2.1. Выделение гуминовых кислот и гуминоподобных веществ из природного материала........................................ 43
2.1.1. Подготовка лечебных грязей и выделение гуминовых кислот 43
2.1.2. Выделение гуминоподобных веществ из препаратов: полифепан и гриб Чага (ЫопоЬя oЫiquus)............................... 45
2.2. Синтез эпоксиазоадсорбентов аффинного типа............... 46
2.2.1. Эпоксиактивация полимерного носителя................... 46
2.2.2. Определение концентрации активных эиоксигрупп.......... 47
3
стр.
2.2.3. Иммобилизация вставки и лиганда на поверхность эпоксиакти-
вированных адсорбентов ЬН-20 и 0-100...................... 47
2.3. Подготовка сорбентов и особенности хроматографического ре-
жима при гельпроникающей хроматографии исследуемых образцов....................................................... 50
2.4. Параметры используемых приборов и условия получения хроматографических и физико-химических параметров 50
2.4.1. ОШ - элементный анализ.................................... 51
2.4.2. Ультрафиолетовые и инфракрасные спектры................... 51
2.4.3. Ядерный магнитный резонанс на ядрах С13................... 52
2.4.4. Электронный парамагнитный резонанс........................ 52
2.4.5. Высокоэффективная и газо-жидкостная хроматография......... 52
Заключение по главе 2............................................ 54
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Глава 3. ОСОБЕННОСТИ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ ПРПРЕПАР АТ А ФиБС НА ЭПОКСИМОДИФИЦИРОВАННЫХ
АЗОАДСОРБЕНТАХ АФФИННОГО ТИПА.................................... 55
3.1. Исследование особенностей препарата ФиБС хроматографическими методами................................................... 55
3.1.1. Хроматографирование препарата ФиБС на полисахаридных сорбентах и их эпоксимодифицированных аналогах................... 56
3.1.2. Газожидкостная и высокоэффективная хроматография
препарата ФиБС.......................................... 60
3.1.2.1. ГЖ - хроматографирование нативного препарата............ 60
3.1.2.2. ГЖХ и ВЭЖХ хроматографирование пиковых фракций после сорбента Ш-20-ДГЭЭД-ГСК-Нов...................................... 61
14
принято выделять и гиматомелановые кислоты, представляющие собой фракцию, извлекаемую при помощи этилового спирта [32,33,37].
Внутри фракции ГК, выделенных щелочным экстрагентом, выделяется подгруппа новообразованных (молодых) ГК, которая характеризуется высокой степенью гидролизуемости, большей долей высокомолекулярных фракций, низкими величинами коэффициента экстинции, низким содержанием ароматических структур, карбоксильных и метоксильных групп [10, 39]. Зрелые (сильно гумифицированные) ГК, обладают электронодонорными свойствами, проявляют относительно сильную оптическую плотность в УФ и видимой областях спектра, очень устойчивы к химической и микробиологической деградации, характеризуются высоким содержанием ароматических и уменьшением алифатических структур, высоким содержанием углеводных компонентов (особенно гексоз: глюкозы, галактозы), длинноцепочечных жирных кислот с относительно высоким содержанием азота. При этом отмечена высокая конденсированость и уменьшение молекулярного веса макромолекулы ГК [39, 127, 130, 134, 198].
В основе недавно предложенной классификации ГВ, разработанной И.В. Перминовой, лежит комплекс инте1ральных параметров состава, соответствующий трём иерархическим уровням организации органических соединений -элементному, структурно-групповому, молекулярному, что позволяет обобщать ГК, отличающиеся по процессам образования [78].
Воздействие амилолитических и протеолитических бактерий способствует дальнейшей трансформации ГВ до низкомолекулярных компонентов [18]. В ряде работ исследовано разложение ГК естественного и синтетического происхождения грибами белой гнили [136, 153], являющейся самым эффективным биотрансформатром лигнина в природе [167]. В них было показано, что при разложении ГК формируются ФК с более низкой молекулярной массой и углекислый газ (СОг) [161, 170, 185]. Существенные различия микробиологического разрушения определяются у ГК и ФК, выделенных из различных источников. Так по данным радиохимического анализа С14, среднее время существования ГК определяется 495 - 1235 лет. Примечательно, что меченые грибковые мела-
15
нины, которые являются ГПВ, выделенными из грибковых культур, устойчивы к описываемому микробному разложению [219]. Степень гумификации у донных отложений озер увеличивается с глубиной залегания, наиболее сильные изменения вещества происходят в поверхностном слое (глубина на 0±2 см), а сам процесс гумификации в отложениях озера состоит одновременно из деградации и полимеризации [183]. Наибольшую окислительную способность ГК проявляют в верхних слоях (около 2 см), а относительно высокую восстановительную способность в глубже лежащих слоях, при этом восстановленные ГК связывают ионы металлов в несколько раз активнее, чем окисленные [184]. Такая активность может быть связана с УФ облучением, и микробиологической активностью [135, 196]. Внешне ГК имеют темно-бурую или почти черную окраску, интенсивно окрашивая водные золи и водно-щелочные растворы гуматов щелочных металлов [150]. Наличие непредельных связей в ГК объясняет их спектральную активность в широком диапазоне длин волн от 220-320 до 750 нм [39, 126]. Спектр ГК в видимой и УФ области характеризуется отсутствием четко выраженных максимумов поглощения и представляет собой ниспадающую кривую с уменьшением оптической плотности по мере увеличения длины волны [71, 152]. Окраска и, соответственно, характер УФ спектров ГК обусловлены развитой системой сопряженных двойных углерод-углеродных связей, а наличие хромофоров, ауксохромов усиливает окраску соединений [76, 145]. Разрыв системы полисопряжения приводит к уменьшению оптической плотности ГК, так как при этом уменьшается степень делокализации л-электронов [37].
Структура молекул ГК характеризуется наличием ароматических фрагментов, замещенных алифатическими цепочками, функциональными группами (главным образом карбоксильными и гидроксильными) и обширной полисахаридно-пептидной периферией [47, 224], которая ответственна и за вторичную структуру ГК [150]. Структурные фрагменты молекулы ГК показаны на рисунках 1.1. и 1.2.
- Киев+380960830922