Экспериментальное обоснование использования цереброспинальной жидкости крупного рогатого скота как компонента питательных сред

Оглавление
1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ 5
2 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 8
2.1. Цереброспинальная жидкость как биологически активное 8 средство
2.2 Питательные среды для культивирования перевиваемых линий 22
клеток животных
3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 44
3.1. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ 44
3.2. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 58
3.2.1. Сравнительная оценка состава цереброспинальной жидкости и 58 сыворотки крови крупного рогатого скота
3.2.2. Получение и оценка биотехнологических свойств сублинии пе- 72 рсвивасмой линии клеток почки африканской зеленой мартышки при добавление в питательную среду ликвора крупного рогатого скота
3.2.2.1. Получение сублинии перевиваемой линии клеток почки афри- 72 канской зеленой мартышки при добавление в питательную среду ликвора крупного рогатого скота
3.2.2.2. Биохимические показатели питательных сред используемых для 78 выращивания клеток почки африканской зеленой мартышки СУ-1(ВНИИВВиМ)
3.2.2.2.1. Изучение утилизации глюкозы клетками почки африканской зе- 78 леной мартышки С\М(ВНИИВВиМ) при выращивании в различных питательных средах
3.2.2.2.2. Изучение активности лактатдегидрогеназы в различных пита- 80 тельных средах
3.2.2.2.3. Оценка накопления молочной кислоты в питательных средах,
*
У
используемых для культивирования сублинии перевиваемых 82 клеток почки африканской зеленой мартышки СУ-ЦВНИИВВиМ)
.2.2.4. Изучение активности аспартатаминотрансферазы в различных 84
питательных средах .2.3. Цитоморфологическая и кариологическая характеристика полу- 87
ченной сублинии перевиваемой линии клеток почки африканской зеленой мартышки при добавлении в питательную среду цереброспинальной жидкости крупного рогатого скота .2.4. Исследование чувствительности полученного трофоварианта 93
сублинии перевиваемых клеток СУ-1 (ВНИИВВиМ)-Л к вирусу чумы плотоядных по сравнению с исходной линией клеток почки африканской зеленой мартышки СУ-1 (ВНИИВВиМ)
.3. Изучение влияния цереброспинальной жидкости крупного ро- 95
гатого скота на клонообразование ПЛК РК-15/В5
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ. 98
ВЫВОДЫ ПВ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ . 120
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 122
ПРИЛОЖЕНИЯ 152
этого оперированных безуспешно). Хорошие результаты получила, при замещении стекловидного тела цереброспинальной жидкостью, Г.Г. Бордюгова (1973).
В.В. Ткач с соавт., (1976) изучали действие СМЖ на регенерацию эпителия роговой оболочки кроликов. Результаты научного эксперимента показали, что при введении цереброспинальной жидкости внутримышечно, а также при закапывание в глаз, усиливаются процессы регенерации эпителия роговой оболочки.
Некоторые исследователи считают, что применение цереброспинальной жидкости человека в терапевтических целях нецелесообразно, так как это связано с трудностями ее получения в больших количествах. Они выражают мнение, что получение ликвора у здоровых людей аморально с точки зрения медицины. Показано также, что поскольку цереброспинальная жидкость больных людей патологически изменена, ее применение становится нецелесообразным (Kafka, 1930; Бордюгова, 1973).
Поэтому широкое распространение получили методы коррекции различных заболеваний цереброспинальной жидкостью животных (гетероликвороте-рапия), в частности крупного рогатого скота. Ведущим инициатором данного научного направления стал А.П. Фридман (1936,1957,1971).
Вызывают большой интерес работы, посвященные применению цереброспинальной жидкости животных в качестве кровезаменителя при больших кровопотерях, а также ее использование для профилактики и лечения анафилактического шока.
А.П. Фридман (1940) провел около 50 переливаний прижизненно полученного ликвора крупного рогатого скота лабораторным животным (морские свинки, собаки, кролики) при экспериментально вызванной кровопотере. Автор на основании проведенных исследований показал о возможности замещения крови ЦСЖ до 75-78 процентов.
В 1941 году под руководством А.П. Фридмана при ранениях и сильных кровопотерях у людей в ленинградских клиниках производили внутривенное
15
введение цереброспинальной жидкости для замещения крови и восстановления объема циркулирующего кровотока (более 108 трансфузий ЦСЖ в объемах 100 - 300 мл). В итоге автором установлено, что показатели периферической крови, работы сердечно-сосудистой системы и дыхательной системы нормализовава-лись.
Фридман А.П. и соавт. (1936, 1957) провели также несколько серий опытов по использованию цереброспинальной жидкости крупного рогатого скота в качестве кровезаменителя. Опыты проводились на морских свинках и кроликах. Трансфузия цереброспинальной жидкости составляла 5-20 % от общего количества крови подопытных животных. Цереброспинальная жидкость при этом благоприятно влияла на вегетативные функции и обмен веществ (массу тела, температура, пульс и другие клинические показатели).
В другой серии опытов на собаках вливание цереброспинальной жидкости достигало 20-50 % всей массы крови подопытных животных. Результаты исследований свидетельствовали о том, что у собак возможно замещение лик-вором крови до 50% .
В опытах на кроликах Г.Т.Шульгин с соавт. (1977), В.В.Ткач с соавт. (1978), Г.Т.Шульгин (1983), установили, что в условиях острой кровопотери, прижизненно полученной цереброспинальной жидкостью крупного рогатого скота можно заменить 30% крови. При этом объем циркулирующей крови быстрее восстанавливается с полноценным белковым составом, происходит синтез альбуминов и глобулинов, уменьшается кислородное голодание тканей и органов и, в первую очередь, печени. Повышается активность клеточных и тканевых ферментов плазмы. Дыхательная функция крови в постгеморрагическом периоде, восстанавливалась. Кроме выше перечисленного исследователи отмечали, что цереброспинальная жидкость обладает выраженным биостимулирующим действием на регенеративные процессы крови.
Согласно исследованиям М.В. Несадзе, (1973) цереброспинальная жидкость от здоровых людей и крупного рогатого скота усиливает фибринолитиче-